"KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NCI-SNU-119細胞系相關產品：NRK clone 49F細胞、MDAMB134細胞、H-2172細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關產品：Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
UCH1細胞系相關產品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
細胞生長：貼壁
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２傳代
MC57細胞系相關產品：NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
SNU182細胞系相關產品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
LS-123細胞系相關產品：Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞
SKNBE細胞系相關產品：PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
ME 180細胞系相關產品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、RD 2細胞、IR 983F細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
BEL/FU細胞系相關產品：KOSC-2 cl3-43細胞、HBL1細胞、RT-BM細胞
NCI-H1092細胞系相關產品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
Ca Ski細胞系相關產品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、D-407細胞
GM346細胞系相關產品：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
NCIH1688細胞系相關產品：NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
Huh-7.5細胞系相關產品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
HCC 70細胞系相關產品：Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
BT-549細胞系相關產品：H719細胞、Karpas-422細胞、Dami細胞
MSB1細胞系相關產品：LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
RMS1598細胞系相關產品：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細胞系
HL-60 Clone 15細胞系相關產品：HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
B/C3T3細胞系相關產品：NCI-H1672細胞、HMC細胞、HNE3細胞
MDA-MB 231細胞系相關產品：HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
LA795細胞系相關產品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
293 c18細胞系相關產品：NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞
LC1sq細胞系相關產品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
ACC-2細胞系相關產品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
PLA801-95C細胞系相關產品：NCI-HUT-292細胞、SK Mel 1細胞、H841細胞
WEHI 164細胞系相關產品：HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
L cell line細胞系相關產品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
RGC5細胞系相關產品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
SK-MEL 28細胞系相關產品：NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞
OVCA433_Bast細胞系相關產品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
HOS-143B細胞系相關產品：DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
Hs-274-T細胞系相關產品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
H-1930細胞系相關產品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關產品：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
HEP3B2細胞系相關產品：Hos TE-85細胞、H647細胞、HMSC細胞
PC-3M-IE8細胞系相關產品：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
3T3-A31細胞系相關產品：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
COLO-684細胞系相關產品：DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
SAOS 2細胞系相關產品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
NCIH1155細胞系相關產品：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
BS-C-1細胞系相關產品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
H3255細胞系相關產品：RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
COLO-HSR細胞系相關產品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
SKMEL-31細胞系相關產品：NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
HEB細胞系相關產品：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
NK 10a細胞系相關產品：NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
CEM/C1細胞系相關產品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關產品：SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞
JROECL19細胞系相關產品：LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
NCI-H1836細胞系相關產品：GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
DU145細胞系相關產品：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
N2a細胞系相關產品：MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞
NT2D1細胞系相關產品：GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
KNS-42細胞系相關產品：P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
SW-1783細胞系相關產品：FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞
SNU-16細胞系相關產品：2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
MGc80-3細胞系相關產品：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞
OCI/AML4細胞系相關產品：SK-N-BE-2c細胞、MPC11細胞、OCI/AML4細胞
HEL299細胞系相關產品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
B16/F1細胞系相關產品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
BT549細胞系相關產品：HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
Hs 934.T細胞系相關產品：MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
Hs 742.T細胞系相關產品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關產品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
NBL-3細胞系相關產品：RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞
LCMS細胞系相關產品：KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
16-HBEo細胞系相關產品：Normal Rat Kidney-49F細胞、OSC-19細胞、NCIH1915細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關產品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細胞系
CCRF-CEM C7細胞系相關產品：1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞
MDA1386細胞系相關產品：BT-549細胞、H378細胞、NBL-7細胞
NR8383.1細胞系相關產品：NCIH520細胞、CAKI 2細胞、SW 954細胞
Ca Ski細胞系相關產品：Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、Mel-MeWo細胞、NCI-H2198細胞
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