"TE-1 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞 SK-MES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細(xì)胞、BBE細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞 T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 TE-1 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿。 A375.S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細(xì)胞、NH6細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞 C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞 Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞 AM-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細(xì)胞、EBNA-293細(xì)胞、HN-6細(xì)胞 SUM-52-PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細(xì)胞、HN13細(xì)胞、HuH1細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 TE-1 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞 HEC-151細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2-luc細(xì)胞、H358細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞 THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞 CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞 HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞 OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞 TR 146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細(xì)胞、SNB19細(xì)胞、KM H-2細(xì)胞 SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞 DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞 AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞 TE-1 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系 NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞 HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞 NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞 WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞 RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞 Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞 Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞 Nb2-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細(xì)胞、L-363細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞 GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞 X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞 SNU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞 HEK293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞 CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞 HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞 HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞 GL-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-746T細(xì)胞、NCI-H1623細(xì)胞、CCLP-1細(xì)胞 639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞 GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞 TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞 HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞 LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞 SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞 CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞 KU 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9 (Hamprecht)細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞 CL MC/9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL 1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞、NOR-10細(xì)胞 SHI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24(ECV304)細(xì)胞、C32r細(xì)胞、A 172細(xì)胞 OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞 Hs870T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞 H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞 Y3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細(xì)胞、DiFi細(xì)胞、DHL8細(xì)胞 HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞 HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞 HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞 S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞 Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞 GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞 P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞 ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞 Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞 P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞 D-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8細(xì)胞、138 MG細(xì)胞、SNU1040細(xì)胞 SKRC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1155細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞 MGH-U3 (RN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、BV-173細(xì)胞 VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞 HBL-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞 HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞 RKOE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190PT細(xì)胞、BCECs細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞 U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞 H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞 CCC-HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF763細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞 TE-1 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系 NCIH1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細(xì)胞、WRL68細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞 Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞 SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT8細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、U-266細(xì)胞 THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、74Int細(xì)胞 "
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