"WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
C166細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
NCIH1373細胞系相關產(chǎn)品：H774細胞、BAR-T細胞、OVTOKO細胞
IM-95細胞系相關產(chǎn)品：A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
細胞生長：貼壁
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２傳代
OE-19細胞系相關產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
MODE-K細胞系相關產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
PG [Human lung carcinoma]細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2009細胞、LWnt3A細胞、CL11細胞
HuLEC-5a細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
MV-4:11細胞系相關產(chǎn)品：SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
A3細胞系相關產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
MESSA細胞系相關產(chǎn)品：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞
H-EMC-SS細胞系相關產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
U251MG細胞系相關產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
COLO678細胞系相關產(chǎn)品：P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
H-1437細胞系相關產(chǎn)品：H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞
CNE-2細胞系相關產(chǎn)品：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細胞系
NPC-TW-039細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
CAL 85-1細胞系相關產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
HC11細胞系相關產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
K299細胞系相關產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
NCIH2073細胞系相關產(chǎn)品：BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
Hs-852-T細胞系相關產(chǎn)品：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞
HEK 293細胞系相關產(chǎn)品：WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
RPMI-6666細胞系相關產(chǎn)品：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
NCIH196細胞系相關產(chǎn)品：YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
HEK 293A細胞系相關產(chǎn)品：ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
SW 48細胞系相關產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
H341細胞系相關產(chǎn)品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品：RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞
SU.86.86細胞系相關產(chǎn)品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
RT4細胞系相關產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
SW962細胞系相關產(chǎn)品：A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞
C3H10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
GM2131細胞系相關產(chǎn)品：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
WM 239-A細胞系相關產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
Ra No. 1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
PC-3M-1E8細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
M210B4細胞系相關產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
C3H/10T1/2-clone8細胞系相關產(chǎn)品：MSF細胞、SW-962細胞、NSC-34細胞
RAW264細胞系相關產(chǎn)品：TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
FDC-P1細胞系相關產(chǎn)品：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞
HCC2157細胞系相關產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
OSRC2細胞系相關產(chǎn)品：GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞
GalK 1細胞系相關產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
C8166-CD4細胞系相關產(chǎn)品：KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
Hs 27細胞系相關產(chǎn)品：TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞
Hs 683細胞系相關產(chǎn)品：RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
BEL-7404細胞系相關產(chǎn)品：CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
OCI/AML3細胞系相關產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
AZ521細胞系相關產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
CHO-ori細胞系相關產(chǎn)品：FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
HIT-T15細胞系相關產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
CCD 966 SK細胞系相關產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
PL-9細胞系相關產(chǎn)品：IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
OCIAML5細胞系相關產(chǎn)品：Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
U-87 MG細胞系相關產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
MDA-MB-435S細胞系相關產(chǎn)品：Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞
786O細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
HANK細胞系相關產(chǎn)品：BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
PT-K75細胞系相關產(chǎn)品：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
CT 26細胞系相關產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細胞、CMT 64細胞、GM-346細胞
WM266-4 epithelioid cells人黑素瘤細胞系
H-209細胞系相關產(chǎn)品：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
ME-180細胞系相關產(chǎn)品：B16BL-6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、HCC-4006細胞
UO-31細胞系相關產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、GM637A細胞、LM8細胞
MESSA細胞系相關產(chǎn)品：M109細胞、4-1st細胞、HL-60 Clone 15細胞
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