"WM266-4 Cell:人黑素瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
WM266-4 Cell:人黑素瘤細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
NT2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
NCIH1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
細胞生長特性：貼壁生長
WM266-4 Cell:人黑素瘤細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
WEHI 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
A9 (Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
WM266-4 Cell:人黑素瘤細胞系
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
Oregon J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC6細胞、hTERT-HME1細胞、ARIP細胞
MHCC-LM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細胞、JROECL19細胞、Hs934T細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
OCI/AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
MDA134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
NCI-H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
Hs_578t細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
HTR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
NCI-H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
KG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
EAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、Swiss-3T3細胞
NRK52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1500細胞、SK-MEL-2細胞、SKNEP1細胞
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
Wien-133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞
H1882細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
AML-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
Eca109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
hOMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、NCI-SNU-601細胞、NCI-H847細胞
WM266-4 Cell:人黑素瘤細胞系
NOR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-387細胞、SL-29細胞、UM-UC14細胞
OCM1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
UMUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
2PK3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
TR-146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞
OSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
Rin-M-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
SU8686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM2細胞、Hs-695-T細胞、V 79-4細胞
MDCK (NBL-2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-26細胞、EL 4細胞、SW 1222細胞
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