"SNU-354 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
OCI/AML-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SNU-354 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
NKM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
SNU-354 Cell:人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱(chēng)指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
Chinese Hamster Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞
293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 3細(xì)胞、SUM159細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞
mIMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-023細(xì)胞、CEM C7細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞
HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-295細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞
CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞
MDA-MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞、TW-039細(xì)胞
SNU-354 Cell:人肝癌細(xì)胞系
OK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag123細(xì)胞、C-8161細(xì)胞、KU 812細(xì)胞
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞
NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-889細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞、AN3細(xì)胞
HCC-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞
FU-97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCl-H157細(xì)胞、MAD109細(xì)胞、Hs819T細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCe-8693細(xì)胞、MFHL-2細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
MDAMB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞、SJRH-30細(xì)胞
PC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞、KM933細(xì)胞
SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞
Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞
SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞
RFL 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞、SUM52細(xì)胞
SU-DH-L5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61細(xì)胞、RetroPack PT67細(xì)胞、EBTr細(xì)胞
HLEC-SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞
OV 2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞
H-820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M IE8細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞
H-820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M IE8細(xì)胞、HNE-2細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞
SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞
Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞
ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞
HMO6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞
LC-2 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞
IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞
HeLa 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞
AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞
U251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AO細(xì)胞、Cattle chondrocytes細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
H-1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-3細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞、CPA47細(xì)胞
NK62a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞
NK62a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞
SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞
V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞
SNU-354 Cell:人肝癌細(xì)胞系
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞
mRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞
KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細(xì)胞、IB-RS-2細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞
X63-AG 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-5細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞、H-157細(xì)胞
Earles's cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3 H1細(xì)胞、FL83B細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
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關(guān)鍵字: SNU-354 Cell:人肝癌細(xì)胞系
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