"HuH-1 Cell:人肝癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
H-2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
PC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞
LWnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
BHK21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HuH-1 Cell:人肝癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HARA-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細胞、MARC145細胞、DR2R1610細胞
HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
HuH-1 Cell:人肝癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
Jiyoye (P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細胞、COS1細胞、HMCB細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
KHYG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
LLC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
HuH-1 Cell:人肝癌細胞系
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞
CCC-HEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞
HA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
EBTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞
PCI-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細胞、NUGC4細胞、HUT125細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
HEC251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細胞、IHH4細胞、MDA453細胞
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
PNT1-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL4細胞、GC-1細胞、MSTO-211細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
HCC1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1588細胞、REC細胞、SNU-16細胞
253JBV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
HCT-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
CFSC-8B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞
HcerEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細胞、Hepa1-6細胞、hUC-MSC細胞
A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
HCC9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
MDA134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
SCC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞
TE 671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
HEK-AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
WEHI 164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-OA細胞、H-250細胞、Neuro-2a細胞
SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
HuH-1 Cell:人肝癌細胞系
NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞
NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細胞、RAW264.7細胞、Blotchy fibroblast-11細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
108CC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
UM-UC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
H-2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細胞、MKN7細胞、JIMT細胞
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