"SNU-398 Cell:人肝癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 COLO 680N細胞系相關產(chǎn)品:SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞 HKF細胞系相關產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞 K562/ADP細胞系相關產(chǎn)品:SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞 RKO細胞系相關產(chǎn)品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 SNU-398 Cell:人肝癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 造成實驗室細胞污染常見情況總結:細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 LLC細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC 52細胞、Eca 109細胞、OCI-AML-2細胞 HIEC-6細胞系相關產(chǎn)品:GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞 SF295細胞系相關產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞 CCD19Lu細胞系相關產(chǎn)品:Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞 IPECJ2細胞系相關產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞 細胞生長特性:貼壁生長 SNU-398 Cell:人肝癌細胞系 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 WB F344細胞系相關產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞 Det. 562細胞系相關產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞 PLC8024細胞系相關產(chǎn)品:LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞 BEL 7402細胞系相關產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞 SKMEL28細胞系相關產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞 FHL 124細胞系相關產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 HEL-92細胞系相關產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞 SNU-398 Cell:人肝癌細胞系 TO 175.T細胞系相關產(chǎn)品:RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞 PLB 985細胞系相關產(chǎn)品:SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞 GM2132細胞系相關產(chǎn)品:CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞 VP 267細胞系相關產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞 HSC6細胞系相關產(chǎn)品:HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞 Leukemia 1210細胞系相關產(chǎn)品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞 MDA-157細胞系相關產(chǎn)品:SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞 C-Lu-65細胞系相關產(chǎn)品:CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞 MCF7-CTRL細胞系相關產(chǎn)品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞 MCF7-CTRL細胞系相關產(chǎn)品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞 190PT細胞系相關產(chǎn)品:Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞 PG13細胞系相關產(chǎn)品:MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞 MDA361細胞系相關產(chǎn)品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞 U2-OS細胞系相關產(chǎn)品:bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞 H35 Reuber細胞系相關產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞 Baby Hamster Kidney 21細胞系相關產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞 UMNSAH-DF-1細胞系相關產(chǎn)品:U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞 ES-2細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML-2細胞、GMK,BSC-1細胞、TOV-112細胞 SKLMS-1細胞系相關產(chǎn)品:NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞 2008細胞系相關產(chǎn)品:T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞 X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關產(chǎn)品:MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞 AC16 [Human hybrid]細胞系相關產(chǎn)品:SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞 U-138-MG細胞系相關產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞 Eca-109細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞 KBM-7細胞系相關產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞 B-95-8細胞系相關產(chǎn)品:L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞 HPAF-II細胞系相關產(chǎn)品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 AN3 CA細胞系相關產(chǎn)品:BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞 BIC-1細胞系相關產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細胞、SW-756細胞、ONS76細胞 Mel526細胞系相關產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞 NCI-H1963細胞系相關產(chǎn)品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞 DKMG細胞系相關產(chǎn)品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞 COV504細胞系相關產(chǎn)品:H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞 KMS-11細胞系相關產(chǎn)品:NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 WIL2-S細胞系相關產(chǎn)品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞 CL-34細胞系相關產(chǎn)品:MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞 293T細胞系相關產(chǎn)品:CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞 SW 1116細胞系相關產(chǎn)品:WM239A細胞、PF382細胞、MCF-12A細胞 HCT8細胞系相關產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞 RL-95-2細胞系相關產(chǎn)品:SK-ES-1細胞、Y3-Ag123細胞、SUDHL2細胞 HuNS1細胞系相關產(chǎn)品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞 RERF-LCMS細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞 HcaF細胞系相關產(chǎn)品:H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞 SNU-398 Cell:人肝癌細胞系 NS1-Ag 4/1細胞系相關產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞 GM03569D細胞系相關產(chǎn)品:MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞 H1666_DA細胞系相關產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞 EBC-1/original細胞系相關產(chǎn)品:Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞 OCI-AML-3細胞系相關產(chǎn)品:HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞 AgC11x3A細胞系相關產(chǎn)品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞 Soleus clone 8細胞系相關產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞 GM2132細胞系相關產(chǎn)品:CCD 841 CoTr細胞、H2347細胞、WEHI-3細胞 LAC細胞系相關產(chǎn)品:SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞 NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品:3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞 SO-Rb 50細胞系相關產(chǎn)品:293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞 SK-Mel 2細胞系相關產(chǎn)品:GMK,BSC-1細胞、A9 (Hamprecht)細胞、HEC1-A細胞 "
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