"SNU-398 cell line人肝癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SNU-398 cell line人肝癌細胞系
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁生長
有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
SNU-398 cell line人肝癌細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
CCF-STTG1細胞系相關產(chǎn)品:MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
SW-954細胞系相關產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
H-1954細胞系相關產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
Bx-PC3細胞系相關產(chǎn)品:Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
Hs600T細胞系相關產(chǎn)品:SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
A549-Taxol細胞系相關產(chǎn)品:MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
HEI193細胞系相關產(chǎn)品:DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關產(chǎn)品:SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
RFL6細胞系相關產(chǎn)品:HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關產(chǎn)品:MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
COLO 679細胞系相關產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞
HSCT6細胞系相關產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
WM-239-A細胞系相關產(chǎn)品:Daudi細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞、MKN-28細胞
SNU-398 cell line人肝癌細胞系
NT2細胞系相關產(chǎn)品:T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
Eca109細胞系相關產(chǎn)品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
Eca109細胞系相關產(chǎn)品:H283細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞、H1341細胞
HOP-62細胞系相關產(chǎn)品:LK2細胞、HUTU80細胞、T24細胞
P-388D1細胞系相關產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞
A2780S細胞系相關產(chǎn)品:OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
Dx5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
LS1034細胞系相關產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
SVGp12細胞系相關產(chǎn)品:H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
SU-86-86細胞系相關產(chǎn)品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
WM 2664細胞系相關產(chǎn)品:TE-9細胞、SK-MEL24細胞、MV411細胞
OSK-1細胞系相關產(chǎn)品:REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞
8226/S細胞系相關產(chǎn)品:LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
MC-38細胞系相關產(chǎn)品:OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
Colon 26細胞系相關產(chǎn)品:Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
LA795細胞系相關產(chǎn)品:Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
DMS 153細胞系相關產(chǎn)品:Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
HET-1A細胞系相關產(chǎn)品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
RPMI #8226細胞系相關產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
MA 104細胞系相關產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
PLC/PRF5細胞系相關產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
F-36P細胞系相關產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞系相關產(chǎn)品:PG-4細胞、MESSA-DX5細胞、RCC4細胞
MCF7/WT細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
RC-4B細胞系相關產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
MB231細胞系相關產(chǎn)品:MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
RC-4B細胞系相關產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
IOSE80UBC細胞系相關產(chǎn)品:HBL1細胞、SW 962細胞、NCIH2141細胞
P30/0HK細胞系相關產(chǎn)品:UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞
SW527細胞系相關產(chǎn)品:R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
BMDC細胞系相關產(chǎn)品:KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
TE-10細胞系相關產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
TE-10細胞系相關產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
B78細胞系相關產(chǎn)品:RPMI6666細胞、SW-1783細胞、ASH3細胞
U 266細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
Hopkins-92細胞系相關產(chǎn)品:SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
Farage Original Line細胞系相關產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
TW-039細胞系相關產(chǎn)品:RT-4細胞、102PT細胞、GalK 1細胞
KNS42細胞系相關產(chǎn)品:MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
SUM-159PT細胞系相關產(chǎn)品:Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞
HCC-1143細胞系相關產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
NCTC clone 929細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
SNU-398 cell line人肝癌細胞系
OVCAR10細胞系相關產(chǎn)品:U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
Hs675細胞系相關產(chǎn)品:H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
L-428細胞系相關產(chǎn)品:NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
MCF.10A細胞系相關產(chǎn)品:HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
SK MEL-28細胞系相關產(chǎn)品:Mv 1 Lu細胞、MonoMac6細胞、SNU484細胞
B16/F10細胞系相關產(chǎn)品:Panc_05_04細胞、Nakata-1細胞、SKNAS細胞
H1954細胞系相關產(chǎn)品:Eca109細胞、KNS-42細胞、HO-8910PM細胞
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