"RKO Cell:人結腸癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:RKO是一個低分化的結腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型P53,但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRbeta1)。RKO細胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細胞。RKO細胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細胞系。該細胞系在裸鼠中成瘤,且在軟瓊脂中形成集落。 CAL 39細胞系相關產(chǎn)品:MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞 WEHI231細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞 CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產(chǎn)品:UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞 Line 697細胞系相關產(chǎn)品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 RKO Cell:人結腸癌細胞系 細胞培養(yǎng)實驗相關問題總結:支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結果之數(shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MCF7-GFP細胞系相關產(chǎn)品:P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞 A2058細胞系相關產(chǎn)品:SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞 P3/X63-Ag8細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞 NR8383.1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞 SUM-159-PT細胞系相關產(chǎn)品:Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞 細胞生長特性:貼壁生長 RKO Cell:人結腸癌細胞系 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 細胞形態(tài)特性:上皮樣 NCI-H87細胞系相關產(chǎn)品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞 H2291細胞系相關產(chǎn)品:RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞 SKGT4細胞系相關產(chǎn)品:BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞 AAV-293細胞系相關產(chǎn)品:P19細胞、A1847細胞、HECV細胞 RL95-2細胞系相關產(chǎn)品:Clone 166細胞、GM03570細胞、Molm 13細胞 H-660細胞系相關產(chǎn)品:P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞 H-1882細胞系相關產(chǎn)品:IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞 RKO Cell:人結腸癌細胞系 TH1細胞系相關產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞 LNCaP clone FGC細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞 MDAPC2B細胞系相關產(chǎn)品:M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞 Madison細胞系相關產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞 NCI-H1563細胞系相關產(chǎn)品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞 Neuro-2a細胞系相關產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞 HCEC-B4G12細胞系相關產(chǎn)品:AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞 PANC 1005細胞系相關產(chǎn)品:BEP2D細胞、Psi-2-DAP細胞、JVM-3細胞 SMMC 7721細胞系相關產(chǎn)品:EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞 SMMC 7721細胞系相關產(chǎn)品:EBNA293細胞、NCIH1792細胞、H2347細胞 NCI-H292細胞系相關產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞 SNU119細胞系相關產(chǎn)品:MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞 T47-D細胞系相關產(chǎn)品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞 HS 445T細胞系相關產(chǎn)品:MDA.MB.435細胞、PK15細胞、L-cells細胞 HCC0827細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞 SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品:AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞 WILL-2細胞系相關產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、BMF細胞、NCIH2172細胞 Melan-a細胞系相關產(chǎn)品:HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞 H35細胞系相關產(chǎn)品:OV 2008細胞、6T-CEM細胞、OVCAR8細胞 HT29細胞系相關產(chǎn)品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞 A 253細胞系相關產(chǎn)品:P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞 LUDLU 1細胞系相關產(chǎn)品:HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞 NCI.H226細胞系相關產(chǎn)品:HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞 RT4-D6P2T細胞系相關產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞 KYSE 70細胞系相關產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞 Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2107細胞、NCI-H1581細胞、NFS-60細胞 SW 1353細胞系相關產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞 HCT GEO細胞系相關產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞 NCI/ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞 624-mel細胞系相關產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞 Wien 133細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞 RT112細胞系相關產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 RGM-1細胞系相關產(chǎn)品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞 CCRF細胞系相關產(chǎn)品:EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞 HFL-1細胞系相關產(chǎn)品:CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞 686LN-M4e細胞系相關產(chǎn)品:HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞 SK RC 52細胞系相關產(chǎn)品:RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞 16HBE細胞系相關產(chǎn)品:MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞 SNU-886細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞 SB細胞系相關產(chǎn)品:SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞 C28/I2細胞系相關產(chǎn)品:CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞 KYSE 50細胞系相關產(chǎn)品:HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞 NCIH211細胞系相關產(chǎn)品:NIH:OVCAR-10細胞、MDA-361細胞、NCI-H740細胞 RKO Cell:人結腸癌細胞系 MES-SA/Dx-5細胞系相關產(chǎn)品:RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞 Hs281T細胞系相關產(chǎn)品:HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞 MDA-MB-134 VI細胞系相關產(chǎn)品:G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞 HCC4006細胞系相關產(chǎn)品:KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞 Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關產(chǎn)品:UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞 Kupffer細胞系相關產(chǎn)品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞 WEHI 164 TC細胞系相關產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞 Fu97細胞系相關產(chǎn)品:KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞 PLC8024細胞系相關產(chǎn)品:LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞 HCT116細胞系相關產(chǎn)品:Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞 MV522細胞系相關產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞 HNE-2細胞系相關產(chǎn)品:KOPN-8細胞、MFE296細胞、MDA MB231細胞 "
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