"RKO細胞：人結(jié)腸癌細胞系
細胞背景資料：RKO是一個低分化的結(jié)腸癌細胞系。RKO細胞含有野生型P５３，但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRbeta１)。RKO細胞的P５３蛋白的水平高于RKO-E６細胞。RKO細胞系是RKO-E６和RKO-AS４５-１的親本細胞系。該細胞系在裸鼠中成瘤，且在軟瓊脂中形成集落。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
SiHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
Pt-K2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細胞、HFT-8810細胞、HKF細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
CA-46細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細胞、Daoy細胞、9L細胞
Hs 729.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-820細胞、KYSE-50細胞、WM115mel細胞
NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞
SK-MEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
WB-F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
B 95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞
NCI-H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE13細胞、HUT-226細胞、PCI:SG-231細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
MRC 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
OV2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
Capan 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAOV3細胞、BHP 10-3細胞、NCI-SNU-5細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
SVEC4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞
UCH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
HEK 293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞
CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC-1細胞、LNCaP C4-2細胞、3AO細胞
HEK-293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
NCl-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞
RAW264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細胞、U-266細胞、Panc02-H0細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU8686細胞、KG-1細胞、Tu 177細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
SW13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
WEHI 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
HEK-293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
ANA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-127細胞、KBM7細胞、H-2081細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
USMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細胞、NCI-SNU-C2A細胞、MDA415細胞
Panc 03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Ball 1細胞
NUGC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、A549/DDP細胞、2008細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、FDCP-1細胞、JHH-7細胞
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