"RKO cell line人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:RKO是一個(gè)低分化的結(jié)腸癌細(xì)胞系。RKO細(xì)胞含有野生型P53,但缺乏人甲狀腺受體核受體(h-TRbeta1)。RKO細(xì)胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6細(xì)胞。RKO細(xì)胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的親本細(xì)胞系。該細(xì)胞系在裸鼠中成瘤,且在軟瓊脂中形成集落。
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RKO cell line人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng):①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材;②每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長致密時(shí)即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持:細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn),要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
貼壁細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):細(xì)胞凍存液需提前配制,不可直接將DMSO加入細(xì)胞懸液中;不同細(xì)胞消化時(shí)間有差異,以實(shí)際鏡檢結(jié)果為準(zhǔn),大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化,消化時(shí)間不宜過長;應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右,細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期時(shí)進(jìn)行凍存操作,確保細(xì)胞凍存時(shí)狀態(tài),凍存密度可根據(jù)細(xì)胞特性進(jìn)行調(diào)整;凍存細(xì)胞保存溫度應(yīng)低于-130℃,不可在-80℃長期保存。貼壁細(xì)胞凍存操作步驟:從培養(yǎng)箱中取出準(zhǔn)備凍存的細(xì)胞;顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄;酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中;吸去多余的培養(yǎng)基,加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次;加入1ml胰酶,放入37℃消化;消化1min左右,在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況;消化完全后,加3ml完全培養(yǎng)基終止;將細(xì)胞懸液移入15ml離心管中離心,1000rpm/min(約200g)離心3-5min;吸去多余的液體,向細(xì)胞沉淀中加入適量的凍存液,輕輕吸打混勻;按比例分裝至凍存管中;貼好標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中;將凍存盒放入-80℃,降溫過夜后,移入液氮中保存。貼壁細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備事項(xiàng):將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動(dòng)移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒滅菌;細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細(xì)胞凍存液等從4℃冰箱中取出后,復(fù)溫至室溫,備用;程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
RKO cell line人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
SF539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞
WPE-int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2108細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、BIC細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞
SK-LU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞
RKO cell line人結(jié)腸癌細(xì)胞系
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
H596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞
Panc10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞
NCIH524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SDBMSC細(xì)胞、MDA-415細(xì)胞、Kit225細(xì)胞
Walker-256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞
GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
P-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 15細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞
OVCA-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細(xì)胞、Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、Pa14C細(xì)胞
HCEC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-637細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞
MO59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞
HS578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-468細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞
MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
TM4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UC-3細(xì)胞、CWR22R-V1細(xì)胞、TE-11細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
OKAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR1細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞、MC57細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
253JBV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞
FRH-0201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、H-125細(xì)胞、SCLC-21H細(xì)胞
MKN 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、T2細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞
P-388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-3細(xì)胞、SKNBE2細(xì)胞、HLF細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM38細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞
SUPB-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoN細(xì)胞、HCT-8細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞
BIC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、SW-756細(xì)胞、ONS76細(xì)胞
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
HOS-MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB1細(xì)胞、HUC細(xì)胞、H187細(xì)胞
P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1618細(xì)胞、NBLS細(xì)胞、TGW細(xì)胞
RKO cell line人結(jié)腸癌細(xì)胞系
Lewis-Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
COLO357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
C 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU-8988S細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞
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