【產(chǎn)品名稱】：納豆激酶

【 別 名 】：納豆激酶;納豆紅麴;納豆激酶生產(chǎn)廠家;納豆激酶作用;食品級(jí)納豆激酶價(jià)格;食品級(jí)納豆激酶生產(chǎn)廠家;納豆激酶廠家;納豆激酶原粉

【英文名稱】：Nattokinase;Nattoesse Haruno-Ogawa;4-(carboxymethyl)-2-[(1R)-1-[[2-[(2,5-dichlorobenzoyl)amino]acetyl]amino]-3-methylbutyl]-6-oxo-1,3,2-dioxaborinane-4-carboxylic acid;4-(Carboxymethyl)-2-[(1R)-1-{[N-(2,5-dichlorobenzoyl)glycyl]amino}-3-methylbutyl]-6-oxo-1,3,2-dioxaborinane-4-carboxylic acid

【 來  源 】：源自中國(guó)的咸豆豉，在日本得到發(fā)展，由黃豆通過納豆菌（枯草桿菌）發(fā)酵制成豆制品。具有黏性，氣味較臭，味道較甜，不僅保有黃豆的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、富含維生素K2、提高蛋白質(zhì)的消化吸收率，更重要的是發(fā)酵過程產(chǎn)生了多種生理活性物質(zhì)。納豆發(fā)酵過程中由納豆枯草桿菌(Bacillus subtilisl natto)產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶。

【結(jié)構(gòu)類型】：?jiǎn)捂湺嚯?，堿性蛋白酶
【納豆激酶的穩(wěn)定性】：
1.pH穩(wěn)定性
在自然pH值狀態(tài)下，相對(duì)比較穩(wěn)定，在pH值從7升至12時(shí)，室溫下10min內(nèi)穩(wěn)定；pH值低于5時(shí)，則極為不穩(wěn)定，很快失去活性；當(dāng)溫度超過60時(shí)則迅速因蛋白變性而失活。反復(fù)凍融五個(gè)循環(huán)時(shí)，其活性仍保存95%以上，從而表明凍融對(duì)納豆激酶的活性無較大影響。當(dāng)納豆激酶與煮沸的小麥提取液、煮沸的肉湯以及血清蛋白和胃粘液蛋白混合后，納豆激酶的穩(wěn)定有明顯增加，甚至在酸性pH值時(shí)，酶活性也并不完全失掉。
2.熱穩(wěn)定性
在溫度低于45°C時(shí)活性相對(duì)穩(wěn)定，高于60°C則因蛋白質(zhì)變性而迅速失活，凍融對(duì)納豆激酶的活性無較大影響，反復(fù)凍融5次后，該酶仍能保持95%以上的活性。
3.金屬離子穩(wěn)定性
納豆激酶的活性還受一些金屬離子的影響，Hg2+會(huì)使其完全失活，Cu2+、Zn2+、Al3+、Ca2+等離子對(duì)該酶有不同的抑制作用，而Mg2+、Co2+則對(duì)其有激活作用。
4.其他物質(zhì)穩(wěn)定性
E-ACA和EDTA對(duì)納豆激酶活性無明顯影響，而PMSF能完全抑制其活性。1mmol/L的DFP和neguvon則能完全抑制納豆激酶的活性。
【納豆激酶分子量】：
納豆激酶是一種單鏈多肽酶，由于測(cè)定分子量的技術(shù)方法不同，因此所測(cè)得到的分子量也有明顯不同。用SephadexG100柱凝膠過濾法，得到的結(jié)果為20000，用園二色方法測(cè)定為27300。根據(jù)氨基酸順序計(jì)算出該酶的準(zhǔn)確分子量為27.728。
【納豆激酶PI值（等電點(diǎn)）】：
用Svunsson的柱型電泳法，等電聚焦測(cè)定納豆激酶具有對(duì)稱的單一的纖溶酶峰，其PI值為8.6±0.3。等電點(diǎn)可以提供在分離提純納豆激酶時(shí)，考慮調(diào)pH值在PI值附近，有利于酶的純化。
【納豆激酶的底物特異性】：

NK作為絲氨酸蛋白酶，其酰胺水解活性可通過許多合成底物進(jìn)行觀察。對(duì)納豆激酶最敏感的底物為血漿纖溶酶的底物，即S2251；對(duì)底物H2DLArgPNA，S2238，S2266和S2302具有一定的活性，而對(duì)S2444和S2484則明顯地?zé)o活性。納豆激酶有其特異的水解蛋白的氨基酸作用和識(shí)別位點(diǎn)。

【存儲(chǔ)條件】：避光儲(chǔ)存于密封容器中

【產(chǎn)品規(guī)格】：

納豆激酶(nattokinase，簡(jiǎn)稱NK)是一種枯草桿菌蛋白激酶，是在納豆發(fā)酵過程中由納豆枯草桿菌(Bacillus subtilisl natto)產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶（單鏈多肽酶）。

含量為：5000Fu/g、12000Fu/g、20000Fu/g。

納豆激酶規(guī)格單

項(xiàng)目

標(biāo)準(zhǔn)

方法

納豆激酶                     FU/g

20000

見下檢測(cè)方法

色澤                      

類白色至淺黃色

外觀                      

均勻、無可見異物的精細(xì)粉末

干燥失重                        %

≤8.0

CNS5033

重金屬（以鉛（Pb）計(jì)）          mg/kg

＜10

總生菌數(shù)                     cfu/g

＜1000

CNS10890

霉菌及酵母菌                 cfu/g

＜100

CNS12925

大腸桿菌

不得檢出

CNS10951

沙門菌

不得檢出

金黃色葡萄球菌

不得檢出

納豆激酶 Fu與Fu/g的區(qū)別？ 

.納豆激酶在國(guó)際上的標(biāo)準(zhǔn)單位為“Fu”(fibrin degradation unit)，是指每粒納豆激酶產(chǎn)品的納豆激酶含量； 
.“Fu/g”是指每克納豆原料中的納豆激酶含量.

【檢測(cè)方法】：

儀器與試劑（吸光值日本法）

分光光度計(jì)。
高速離心機(jī)。
水浴鍋
Vortex Mixer。
漏斗（直徑8cm）ⅹ1、50m定量瓶ⅹ2、濾紙、50ml離心管ⅹ40、Pipet（5ml、1ml、0.2ml、0.02ml）、ependoffⅹ16、500mlⅹ6、培養(yǎng)皿ⅹ9、游標(biāo)卡尺、Timer droper 1ml。

藥品（吸光值法所需藥品）：

TCA WAKO 204-02405 試藥特技 99%。
CaSO4•2H2O Riedel dehaen 31221 99%。
NaCl WAKO 191-01665 99%。
Sodium Acetate（CH3COONa•3H2O）Amresco 99%。
CH3COOH。
Triton X-100 SIGMA NO.T-68/8。
Sodium Borate•10H2O 日本試藥工業(yè) extra pure 99%。
NaCl WAKO。
Fibrinogen Sigma F-8630（From Bovine plasma）。
Thrombin Sigma F-4648（From Bovine plasma）。
NaOH。

溶液制備

Borate buffer 0.05M（PH 8.5）

Sodium Borate•1010H2O 9.54g + NaCl 4.5g而后加入二次蒸餾水450ml，以HCl（6M）調(diào)整PH至8.5，最后使總體積為500ml。

TCA Solution

TCA 16.34g + 二次蒸餾水至500ml。

Dilution buffer

CaSO4•2H2O 0.177g。

NaCl 0.292g。

1M Sodium acetic buffer 1ml。

10% Triton x - 100 0.25ml。

二次蒸餾水加至 500ml。

Triton x - 100

5.0g + 二次蒸餾水 45ml。

1M acetate buffer （PH 6.0）.

Sodium acetate 12.96g + 二次蒸餾水 50ml 并以 1M醋酸調(diào)整 PH至6.0而后加入二次蒸餾水使總體積達(dá)100ml。

Fibrinogen solution -2.

Fibrinogen 0.144g + Borate buffer 20ml 均勻攪拌使其完全

溶解（30分鐘后）以濾紙過濾得到濾液既是。

Thrombin solution -1

將5000IU Thrombin溶于10ml 0.85% NaCl solution，Thrombin solution -1 濃度為500IU/ml。（需保存于-80℃）。

Thrombin solution -2

Thrombin solution -1 + 4.5ml 0.85% NaCl solution。

Thrombin solution -3

Thrombin solution -1 200微升 + Borate buffer 4.8ml。

0.85% NaCl solution

0.85（g）NaCl + 100（ml）二次蒸餾水。

吸光值法需要配制藥品1、2、3、4、5、7、10
測(cè)定方法

準(zhǔn)備12支試管，為測(cè)量二個(gè)樣品，準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)組及空白組（樣品*3，空白*3）。
于試管中加入0.8ml Fibrinogen 及2.8ml Borate Buffer（0.05mol/L pH8.5），12支試管依序每隔20秒至于37℃水浴。
五分鐘時(shí)，每隔20秒加入Thrombin solution -3 0.2ml，并震蕩10秒鐘，實(shí)驗(yàn)組與空白組都要加。
15分鐘時(shí)，每隔20秒實(shí)驗(yàn)組加入nattokinase 0.2ml，震蕩十秒鐘，而對(duì)照組在17分鐘時(shí)每隔20秒加入5ml TCA，并震蕩10秒鐘，19分鐘時(shí)，每隔20秒加入nattokinase 0.2ml并震蕩10秒鐘。
35分鐘時(shí)，實(shí)驗(yàn)組及空白組每隔20秒震蕩10秒鐘。
39分鐘時(shí)，空白組至37℃水浴移行出來，吸取沒管2.0ml到離心管，離心12000rpm 10分鐘，測(cè)OD 275nm.（rAs）。
55分鐘時(shí)，實(shí)驗(yàn)組及空白組每隔20秒，震蕩10秒鐘。
75分鐘時(shí)，實(shí)驗(yàn)組每隔20秒加入4.0ml TCA，震蕩10秒鐘。
95分鐘時(shí)，將實(shí)驗(yàn)組從37℃水浴中移行出來，吸取每管2.0ml到離心管，離心12000rpm 10分鐘，測(cè)OD275 nm.（rAb）。

計(jì)算方式：

1單位活性（1FU），在本測(cè)試方法中，每分鐘始OD 275 吸光值增加0.01的酵素量。

納豆激酶酵素活性（FU/g）= （rAs - rAb）/0.01/0.1/60 *D

rAs：待測(cè)液之吸光值

rAb：空白組之吸光值

D：樣品稀釋倍數(shù)

【物流時(shí)間】：快遞或物流,國(guó)內(nèi)快遞（百世、中通、申通、德邦、順豐）三天內(nèi)到達(dá),物流五天內(nèi)到達(dá).報(bào)價(jià)一般均含國(guó)內(nèi)運(yùn)輸費(fèi)用

【產(chǎn)品包裝】：1公斤/包；10公斤/箱；25公斤/桶，也可根據(jù)客戶要求包裝。