檢測原理：

本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法?？谷薌M-CSF單抗包被于微孔板上，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中的GM-CSF會與固定在板上的抗體結(jié)合，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化酶標(biāo)記的抗人GM-CSF多抗，未結(jié)合的抗體被洗去；加入底物溶液（顯色劑），溶液顏色與結(jié)合的目標(biāo)蛋白成正比；加入終止液；用酶標(biāo)儀測定吸光度。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測樣本類型：細(xì)胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗人GM-CSF檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：0.089-0.740 pg/mL

檢測范圍：15.6 - 1,000 pg/mL

回收率范圍：85-104%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

背景：

粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF），也稱為CSF-2，是共同β鏈（βc）細(xì)胞因子家族的多營養(yǎng)30 kDa成員，也包括IL-3和IL-5。 GM-CSF采用帶有兩個鏈內(nèi)二硫鍵的α-螺旋構(gòu)型。 它由多種活化的免疫，間充質(zhì)和上皮細(xì)胞類型分泌，并以可變糖基化單體的形式循環(huán)。 在炎癥過程中，它在多種細(xì)胞類型中上調(diào)，包括致腦炎性T細(xì)胞，過敏原暴露的肺內(nèi)皮細(xì)胞和IgE激活的肥大細(xì)胞。 成熟的人GM-CSF與小鼠和大鼠GM-CSF分別具有54％和63％的氨基酸序列同一性。GM-CSF的高親和力受體由50 kDa配體結(jié)合α亞基（GM-CSFRα）和120 kDa信號轉(zhuǎn)導(dǎo)βc組成。 據(jù)報道，功能性GM-CSF受體的化學(xué)計量是GM-CSF，GM-CSFRα和βc的2：2：2復(fù)合物。 值得注意的是，βc亞基由IL-3和IL-5的受體復(fù)合物共享，IL-5可能通過GM-CSFRα和βc發(fā)出信號。 GM-CSF還可以利用Syndecan-2作為共受體（14）。GM-CSF擁有許多功能。 它誘導(dǎo)CD34 +干細(xì)胞前體產(chǎn)生單核細(xì)胞，嗜中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞。 它可以與IL-4或Flt-3配體協(xié)同作用，誘導(dǎo)骨髓和真皮樹突狀細(xì)胞的發(fā)育和維持。 它也起嗜中性粒細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞趨化劑的作用。 GM-CSF促進(jìn)Th1和Th17細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫炎癥以及樹突狀細(xì)胞，小膠質(zhì)細(xì)胞，肺泡巨噬細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞的炎癥激活。 此外，它與G-CSF協(xié)同促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲。人GM-CSF免疫測定是一項(xiàng)3.5-4.5小時的固相ELISA，旨在測量細(xì)胞培養(yǎng)上清液，血清和血漿中人GM-CSF的水平。 它包含大腸桿菌表達(dá)的重組人GM-CSF和針對重組因子的抗體。 已顯示可準(zhǔn)確定量重組人GM-CSF。使用天然人GM-CSF獲得的結(jié)果顯示線性曲線與使用試劑盒標(biāo)準(zhǔn)獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線平行。 這些結(jié)果表明該試劑盒可用于確定人GM-CSF的相對質(zhì)量值。