檢測(cè)原理：

本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。抗人G-CSF單抗包被于微孔板上，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品中的G-CSF會(huì)與固定在板上的抗體結(jié)合，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化酶標(biāo)記的抗人G-CSF多抗，未結(jié)合的抗體被洗去；加入底物溶液（顯色劑），溶液顏色與結(jié)合的目標(biāo)蛋白成正比；加入終止液；用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。

檢測(cè)類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測(cè)樣本類型：細(xì)胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗人G-CSF檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：0.089-0.740 pg/mL

檢測(cè)范圍：31.3 - 2,000 pg/mL

回收率范圍：96-103%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

背景：

粒細(xì)胞集落刺激因子（G-CSF）是24-25 kDa單體糖蛋白，可調(diào)節(jié)嗜中性粒細(xì)胞譜系中造血細(xì)胞的增殖，分化和激活。 成熟的人G-CSF是一種178個(gè)氨基酸（aa）的O-糖基化蛋白，包含兩個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵。 在人類中，交替剪接產(chǎn)生具有3個(gè)氨基酸缺失的第二個(gè)亞型。 小鼠和人G-CSF具有76％的氨基酸序列同一性，并且這兩種蛋白顯示出物種交叉反應(yīng)性。 G-CSF由活化的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，成纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，星形膠質(zhì)細(xì)胞，神經(jīng)元和骨髓基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生。 另外，各種腫瘤細(xì)胞組成性表達(dá)G-CSF。

人G-CSF受體（G-CSF R）是一種120 kDa的I型跨膜糖蛋白，屬于造血素受體超家族。 成熟蛋白由603氨基酸胞外域（ECD），23氨基酸跨膜片段和186氨基酸胞質(zhì)域組成。 ECD包含一個(gè)N端Ig樣結(jié)構(gòu)域，一個(gè)細(xì)胞因子受體同源結(jié)構(gòu)域和三個(gè)纖連蛋白III型結(jié)構(gòu)域。 人G-CSF R的可變剪接產(chǎn)生其他同種型，包括受體的潛在可溶形式。 小鼠和人G-CSF R的ECD具有63％的氨基酸序列同一性。 G-CSF R與配體以2：2的比例形成復(fù)合物。 它在單核細(xì)胞，嗜中性粒細(xì)胞，巨核細(xì)胞，血小板，骨髓祖細(xì)胞，滋養(yǎng)細(xì)胞和胎盤，內(nèi)皮細(xì)胞和各種腫瘤細(xì)胞類型上表達(dá)。

G-CSF是體內(nèi)粒細(xì)胞生成的重要調(diào)節(jié)劑，G-CSF R中的突變與先天性中性粒細(xì)胞減少有關(guān)。 G-CSF可以支持多系造血祖細(xì)胞的生長(zhǎng)，并將其從骨髓動(dòng)員到血液中。 G-CSF通過限制細(xì)胞凋亡率來增強(qiáng)成熟中性粒細(xì)胞的功能能力并支持其生存。 G-CSF還增強(qiáng)了造血祖細(xì)胞引起的M-CSF誘導(dǎo)的單核細(xì)胞生成，并刺激了外周誘導(dǎo)Th2的樹突狀細(xì)胞的增殖。 它促進(jìn)心肌梗塞和腦缺血后T細(xì)胞免疫耐受的發(fā)展以及組織恢復(fù)。 Human G-CSF免疫測(cè)定法是一種3.5-4.5小時(shí)的固相ELISA，旨在測(cè)量細(xì)胞培養(yǎng)上清液，血清和血漿中的人G-CSF。 它包含大腸桿菌表達(dá)的重組人G-CSF和針對(duì)重組蛋白的抗體。 已顯示可準(zhǔn)確定量重組人G-CSF。 使用天然人G-CSF獲得的結(jié)果顯示線性曲線與使用試劑盒標(biāo)準(zhǔn)獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線平行。 這些結(jié)果表明該試劑盒可用于確定天然人G-CSF的相對(duì)質(zhì)量值。