檢測(cè)原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗小鼠CCL5/RANTES抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠CCL5/RANTES與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(zhǎng)(參考校正波長(zhǎng)540nm或570nm)測(cè)定吸光度值。

檢測(cè)類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測(cè)樣本類型：細(xì)胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、抗小鼠CCL5/RANTES檢測(cè)抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：0.089-0.740 pg/mL

檢測(cè)范圍：31.3-2000 pg/mL

回收率范圍：96-103%

保存方法：2-8℃

標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

背景：

趨化性細(xì)胞因子(chemotactic cytokine)對(duì)白細(xì)胞的趨化作用是炎癥發(fā)生過程中的重要起始步驟，也是機(jī)體防御和清除入侵病原體等異物先天性免疫功能的一個(gè)重要方面。調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的活化因子(RANTES)是趨化性細(xì)胞因子CC亞族成員，又稱CCL5。該蛋白來源廣泛，多數(shù)組織在炎性因子IL-1β或TNF-α的刺激下可釋放CCL5。通常，CCL5主要由CD8+T細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和血小板分泌。

CCL5同其他趨化性細(xì)胞因子相同，能以單體形態(tài)或多聚形態(tài)與其特異性受體結(jié)合。CCL5具有二聚體的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，在高濃度時(shí)形成多聚體，胞內(nèi)分泌后常以單體形式存在。細(xì)胞表面的糖胺多糖(GAG)可導(dǎo)致CCL5的多聚化。多聚化CCL5不僅可以激活炎性細(xì)胞，延長(zhǎng)并加重炎性反應(yīng)，還可調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。當(dāng)CCL5為單體或雙體或濃度為納摩爾級(jí)時(shí)，其受體為CCR1、CCR3、CCR4 和CCR5，具有趨化活性、可增強(qiáng)細(xì)胞毒作用和抑制HIV復(fù)制的作用。多聚體形式或微摩爾水平的CCL5主要通過與細(xì)胞表面的GAG結(jié)合導(dǎo)致T細(xì)胞、單核細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的活化，增強(qiáng)HIV的復(fù)制。

CCL5對(duì)多種白細(xì)胞具有趨化作用：1）趨化單核細(xì)胞；2）趨化未刺激的CD4+CD45RO+記憶T細(xì)胞以及活化后的CD4+和CD4+T細(xì)胞；3）趨化嗜酸性粒細(xì)胞并刺激其脫顆粒和呼吸爆發(fā)；4）是嗜堿性粒細(xì)胞較強(qiáng)的趨化劑，但刺激組胺釋放的作用較弱；5）預(yù)處理T細(xì)胞，可增加其與IL-1刺激內(nèi)皮細(xì)胞粘附的能力。這些性質(zhì)使CCL5在免疫調(diào)節(jié)功能及自身免疫紊亂和炎性過程中有重要作用。

CCL5不僅作為一種趨化因子參與炎癥反應(yīng)和介導(dǎo)白細(xì)胞的游走和浸潤(rùn)，而且可調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。