Annexin V- Alexa Fluor 488 / PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

儲存條件：

2-8℃避光保存。 長期保存于-20℃避光。長期多次使用可分裝保存，避免反復(fù)凍融。

有效期：

一年。

產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品背景：

細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和一些疾病發(fā)生過程等方面起著十分重要的作用。在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。在體內(nèi)，巨噬細(xì)胞可以識別翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面的PS 從而將這些程序性死亡的細(xì)胞清除，因此凋亡過程中并不伴隨局部的炎癥反應(yīng)，而在細(xì)胞壞死的過程中則常常伴隨著炎癥反應(yīng)。

AnnexinⅤ是一種分子量為35-36kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的PS高親和力特異性結(jié)合。PS 外翻發(fā)生在細(xì)胞核破裂，DNA 片段化以及凋亡相關(guān)蛋白出現(xiàn)之前，這使得Annexin V 與PS 的結(jié)合成為凋亡早期的一種重要檢測標(biāo)志事件。

檢測原理：

用標(biāo)記了Alexa Fluor 488的Annexin Ⅴ作為熒光探針，利用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。細(xì)胞壞死的過程中也會發(fā)生細(xì)胞膜損傷，壞死的細(xì)胞會結(jié)合Annexin V-Alexa Fluor 488。正常細(xì)胞和早期凋亡細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的，Propidium iodide（PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但在凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞，PI能夠透過細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合呈現(xiàn)紅色。將AnnexinⅤ與PI匹配使用，可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞以及死細(xì)胞區(qū)分開來。壞死細(xì)胞可以同時(shí)與Annexin V-Alexa Fluor 488和PI結(jié)合顯色，而PI則被排除在活細(xì)胞（Alexa Fluor 488陰性）和早期凋亡細(xì)胞（Alexa Fluor 488陽性）之外。在沒有巨噬細(xì)胞的情況下，凋亡的最后階段會像細(xì)胞壞死一樣發(fā)生整個(gè)細(xì)胞的解體，從而使凋亡晚期的細(xì)胞也同時(shí)被Alexa Fluor 488和PI 結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽性。在雙變量流式細(xì)胞儀的散點(diǎn)圖上，左下象限顯示活細(xì)胞，為（Alexa Fluor 488-/PI-）；右上象限是非活細(xì)胞，即壞死細(xì)胞，為（Alexa Fluor 488+ /PI+）；而右下象限為凋亡細(xì)胞，顯現(xiàn)（Alexa Fluor 488+ /PI-）。nnexin V-Alexa Fluor 488細(xì)胞凋亡檢測試劑盒可以方便快捷的檢測凋亡細(xì)胞，使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測設(shè)備進(jìn)行檢測。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

● 方便：可用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測；

● 快速：1小時(shí)內(nèi)即可完成實(shí)驗(yàn)；

● 準(zhǔn)確：能準(zhǔn)確區(qū)分活細(xì)胞、凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞，并計(jì)數(shù)各群細(xì)胞的比例。

檢測方法： 流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡

樣本類型： ● 懸浮細(xì)胞 ● 貼壁細(xì)胞