非酶多糖清除劑(DNA專用)
產(chǎn)品及特點(diǎn)
用很多方法提取的植物、真菌或細(xì)菌基因組DNA樣品中經(jīng)常會含有多糖(Polysaccharide,PS)污染,這些污染會嚴(yán)重影響下游的酶切和PCR等實驗。為此開發(fā)了非酶法多糖清除劑(DNA專用),它具有下列特點(diǎn):
1. 高效,能有效地去除基因組DNA中的多糖污染,使DNA溶液不再粘稠。
2. DNA分子完整性不會受到任何影響。
3. 快速,全部操作在樣品管中完成,只需要二十多分鐘。
4. 穩(wěn)定,本產(chǎn)品為非酶產(chǎn)品,可以常溫運(yùn)輸和保存。
運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
自備試劑 氯仿、TE。
使用方法 1. 如果DNA溶液的體積不夠100 uL,用水或TE補(bǔ)到100 uL。如果超過100uL,可以用的核酸濃縮液(需另買)濃縮到100 uL,或者分成幾個100 uL再處理。
2. 將50 uL溶液A加入到100 uL待處理的DNA樣品中,充分吹打混勻。
3. 15 uL的溶液B,充分吹打混勻。如果溶液B過于粘稠,可以先在65℃保溫后再取用。
4. 加入150 uL的氯仿,充分振蕩半分鐘。
5. 12000-15000 g離心2分鐘,小心轉(zhuǎn)移上清到一新的1.5 mL塑料離心管中,交界處將有白膜樣的多糖沉淀。
6. 重復(fù)上步操作,白膜樣的多糖沉淀將減少。是否需要繼續(xù)此步操作根據(jù)多糖污染嚴(yán)重程度決定??梢砸恢敝貜?fù)直到白膜不再出現(xiàn)。本產(chǎn)品提供的溶液B的量足夠抽提5-6次。
7. 得到的上清液中加入兩倍體積(200 uL)的微量核酸沉淀劑,混勻后12000-15000 g離心10-20分鐘,小心棄上清。注意不要觸及DNA沉淀。
8. 加入1 mL自備的 75%乙醇, 振蕩器上短暫振蕩數(shù)秒后12000-15000g離心2分鐘,小心棄上清。注意不要觸及DNA沉淀。
9. 短暫離心數(shù)秒,用移液槍小心吸去殘留液體(約50 uL)后,加入適量自備TE,立即電泳檢測,OD檢測后放-80℃長期保存。
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