柱式軟體動物DNAout

產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品是專門用于從各種軟體動物組織中提取基因組 DNA 的試劑盒。其原理是基于陽離子去垢劑 CTAB 在適當(dāng)?shù)碾x子強度條件下，特異地跟基因組 DNA 結(jié)合形成沉淀，然后在用硅膠膜技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步純化。本產(chǎn)品具有下列特點：

1. 適用于用常規(guī)方法難以提取的、各種富含多糖的軟體動物動物，包括螺類、貝類、烏賊、章魚和蝸牛等。

2. 提取到的基因組 DNA 完整性，其中最長可以到達(dá)長度一般在 20-50kb。

3. DNA 純凈，OD260/280 一般都在 1.9 左右、DNA 片段大小在 30-50 Kb 左右，可直接用于 PCR、酶切、雜交等。

4. 價廉物美，與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng)，但價格便宜。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大紙盒包裝 
柱式軟體動物溶液 A 101111a 50 mL 柱式軟體動物溶液 B 101111b 15 mL(棕色) 柱式軟體動物溶液 C 101111c 50 mL 蛋白酶 K 溶液（20 mg/mL） 80911 1 mL 離心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊 101111sc 1 份 

運輸及保存 常溫運輸和保存，有效期一年。蛋白酶 K 溶液需要低溫運輸和-20℃保存。

自備試劑 氯仿。

使用方法 

1. 勻漿方法一：稱取 0.1-0.3g 軟體動物組織，轉(zhuǎn)移到塑料研缽中，液氮研磨成粉后轉(zhuǎn)移到一個干凈的 1.5 mL 塑料離心管中。注意：避免使用含二氧化硅的玻璃研缽，因為 DNA 會吸附在表面，影響得率。在離心管中加入 1 mL 溶液A 并用移液槍頭充分吹打混勻。進(jìn)入第三步。

2. 勻漿方法二：將 0.1-0.3g 軟體動物組織剪成小塊，轉(zhuǎn)移到 10-15mL 塑料管中（培養(yǎng)細(xì)菌那種離心管即可），加入 1 mL，用 Polytron 式勻漿機（剪切式勻漿機）勻漿 1 分鐘左右。

3. 在樣品中加入 20 uL 蛋白酶 K 溶液（20mg/mL），37℃保溫 1-3 小時。注意：讓反應(yīng)體系處于搖晃狀態(tài)，此保溫長度一般可以讓樣品徹底溶化。

4. 加入 0.3 mL 的溶液 B 和 0.2 mL 的自備氯仿，振蕩器上振蕩 30 秒充分混勻。

5. 12,000 rpm 室溫離心 3 分鐘，小心將上清轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 塑料離心管中。

6. 在上清液中加入等體積的溶液 C，上下顛倒 30 秒充分混勻。

7. 將混合液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。每次是先將 0.7-0.8 mL 混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置 2 分鐘，12,000rpm 室溫 1 分鐘，棄穿透液。再把剩余的一半上柱，重復(fù)此操作。

8. 將 0.7 mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心半分鐘，棄穿透液。

9. 將 0.3 mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中，12,000 rpm 離心半分鐘（此步為第二次洗滌，一般可以省略）。

10. 空甩離心吸附柱半分鐘去除殘留液體。

11. 將離心吸附柱放置在一新的 1.5 mL 塑料離心管中，加入 30uL DNA 洗脫液3.0。

12. 12,000 rpm 離心 1 分鐘，管底即為 DNA 溶液，可立即用于濃度測定或 PCR，也可長期保存在-20℃。