??????碧云天的細胞凋亡-DNA Ladder抽提試劑盒(離心柱式)(Apoptosis, DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column)是目前最先進的DNA Ladder抽提試劑盒之一。本試劑盒是針對細胞凋亡過程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設(shè)計的。可以非常有效地抽提最小片段為180-200bp的DNA ladder,同時又可以抽提到50kb左右的基因組DNA。 ??????DNA ladder也稱DNA fragmentation,是細胞凋亡的一個重要指標。通常觀察到DNA ladder,就可以判定細胞發(fā)生了凋亡。 ??????樣品首先被蛋白酶K消化,隨后加入適合DNA結(jié)合到純化柱上的緩沖液,然后加入到純化柱內(nèi)。通過高速離心,使DNA在穿過純化柱的瞬間,結(jié)合到純化柱上,隨后通過兩次洗滌去除各種雜質(zhì),最后通過洗脫液把DNA洗脫下來。整個過程無需酚氯仿抽提,無需酒精沉淀,樣品裂解后僅需約15分鐘即可完成。 ??????通過DNA純化柱方式抽提DNA ladder比用傳統(tǒng)的酚氯仿抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易損失。 ??????本試劑盒每次最多可以抽提20mg組織或200-350萬個培養(yǎng)細胞。樣品用量過多,反而會影響抽提效果。 ??????試劑盒提供了RNase A,可以獲得不含RNA的高純度總DNA,排除了RNA對DNA ladder觀察造成的干擾。 ??????純化柱對于DNA的容量約為30微克。通常每200萬Hela細胞或500萬淋巴細胞可以抽提得到15-25微克總DNA,每 25 mg 肝、腦、腎組織可以抽提得到10-30微克總DNA,每25毫克心、肺組織可以抽提得到5-10微克總DNA,每10mg脾組織可以抽提得到5-30微克總DNA。樣品的用量請勿超過純化柱的容量,樣品用量能保持在純化柱容量的70%或以下。當然過少的樣品也不利于檢測到DNA ladder。 ??????對于培養(yǎng)細胞的凋亡檢測,通常6孔板一個孔的細胞就足夠用于DNA ladder的抽提和檢測。 ??????本試劑盒可以抽提50個樣品。 包裝清單:
保存條件: ??????蛋白酶K-20℃保存,其余均室溫保存。一年有效。蛋白酶K室溫(15-25℃)存放一周,活力無明顯下降。 注意事項: ??????溫度較低時樣品裂解液A或樣品裂解液B中可能會有沉淀產(chǎn)生,屬正?,F(xiàn)象。使用前必須檢查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混勻后使用。 ?????? 次使用前洗滌液I需添加7ml無水乙醇,洗滌液II需添加24ml無水乙醇,混勻,并在瓶上做好標記。 ??????本試劑盒需使用55℃或70℃水浴,請?zhí)崆白骱脺蕚洹?br> ??????除特別說明外,每次Vortex應(yīng)控制在5-10秒左右。 ??????本試劑盒所有操作均在室溫進行,操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進行。 ??????廢液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丟棄。 ??????本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 ??????為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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