膜結(jié)合DNA清除試劑盒
產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品是在無RNase的DNase的基礎上開發(fā)的、專門用于在柱式法總RNA抽提過程中,清除硅膠膜上基因組DNA污染的產(chǎn)品,具有下列特點:
1. 快速,反應條件經(jīng)過優(yōu)化,能在5分鐘內(nèi)使硅膠膜上的基因組DNA降解。
2. 不含RNase,可以保證RNA分子完整性不受任何影響。
3. 兼容性廣,跟大多數(shù)柱式RNA提取試劑盒兼容,可以直接整合進去。不需要在提取到總RNA后再單獨去除里面的DNA污染。
運輸及保存 低溫運輸、-20℃保存,通用洗柱液和 RNA 洗脫液可以室溫保存,有效期一年
自備試劑 無
使用方法
1. 將 0.5 mL 通用洗柱液加入到已經(jīng)結(jié)合了 DNA 和 RNA 的硅膠膜離心吸附柱中 ,12000 rpm 室溫離心 10-30 秒。注意:不能使用離子交換吸附柱,Qiagen公司的部分產(chǎn)品使用的是離子交換吸附柱,一部分是硅膠膜離心吸附柱,一定要在實驗前弄清楚。
2. 配制 DNase 工作液 50 uL,即將 10 uL RNase-free DNase 加入到 50 uL膜反應液中,在離心管中吹打混勻。注意:對一般的 mini 型離心吸附柱,膜反應液和 DNase 的總體積不要大于 60 uL,否則酶的濃度將降低,影響 DNA去除效果。
3. 將上步得到的混合液全部轉(zhuǎn)移到一步預洗得到的離心吸附柱中。
4. 室溫放置 5 分鐘。 注意:5 分鐘一般足夠降解大多數(shù)情況下的 DNA 污染。如果 DNA 沒有徹底降解(可能由于樣品中殘留的雜質(zhì)抑制了 DNase 的活性),此步的保溫時間可以適當延長,直到徹底清除為止。
5. 保溫結(jié)束后,直接在離心管中加入 0.5 mL 的通用洗柱液,12000 rpm 室溫離心 10-30 秒。
6. 干甩一次(12000 rpm 室溫離心 10-30 秒)。
7. 將 30-100 uL RNA 洗脫液加入到離心吸附柱的膜中央,12000 rpm 室溫離心 10-30 秒,洗脫液即是無 DNA 的 RNA 樣品??梢粤⒓词褂没蚍?70℃長期保存。
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