柱式糞便DNAout
產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品是動(dòng)物糞便 DNAout(CAT#:70601)的柱式升級(jí)產(chǎn)品,專門用于從各種動(dòng)物糞便中快速提取高質(zhì)量的 DNA。跟動(dòng)物糞便 DNAout,它具有下列特點(diǎn):
1. 操作更加簡(jiǎn)單快速,一個(gè)樣品只需要十多分鐘的時(shí)間。
2. DNA 更加純凈,OD260/280 一般都在 1.8 以上,得到的 DNA 樣品原液或稀釋液可以直接用于 PCR 擴(kuò)增。
3. 每次微量提取可以處理 100-300mg 左右的樣品,能得到 5 ug 左右 DNA,片段長(zhǎng)度在 30 Kb 左右。
4. 可以同時(shí)提取到腸道上皮細(xì)胞和可能的腸道病原菌的 DNA。
5. 試劑無(wú)毒無(wú)害, 環(huán)保。
柱式糞便DNAout
規(guī)格及成分 成 份 編 號(hào) 大紙盒包裝
柱式糞便 DNAout 溶液 A 80102a 25 mL 柱式糞便 DNAout 溶液 B 80102b 25 mL 柱式糞便 DNAout 溶液 C 80102c 40 mL 離心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊(cè) 80102sc 1 份
柱式糞便DNAout運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。自備試劑 氯仿。
使用方法1. 65℃預(yù)熱溶液 A,待其沉淀溶化后充分混勻,取 0.5 mL 加入到 1.5 mL 塑料離心管中并放置于 65℃待用。
2. 稱取 0.1-0.3 g 的糞便,加入到含預(yù)熱溶液 A 的離心管中,震蕩器上劇烈震蕩5-10 分鐘。如果是擴(kuò)量操作,可以使用更多糞便和較大離心管。也可以將同一種糞便在較大離心管中震蕩處理,然后再分到 1.5 mL 離心管中。注意:不論使用大的還是小的離心管,一定要讓管底的糞便震蕩起來(lái)。
3. 將離心管置于 65℃水浴中保溫至少 5 分鐘。
4. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘,將上清轉(zhuǎn)移到一新離心管中(上清液一般呈淡黃色或深棕色,實(shí)際顏色隨樣品而異,上清液的體積一般為 300-400 µL)。
5. 在上清液中加入等體積的溶液 B,上下顛倒 30 秒充分混勻,溶液將呈白色或淡黃色混濁狀。
6. 將離心管冰浴至少 5 分鐘。
7. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的 1.5 mL 離心管中,上清液顏色將比第 4 步得到的上清的顏色稍淡,體積在 0.7 mL 左右。
注意:下面第 8-第 9 步的氯仿抽提操作可以省略,直接進(jìn)入第 10 步,但 DNA 的產(chǎn)量會(huì)低 50%左右,OD260/280 在 1.7-1.8。如果直接進(jìn)入第 10 步,則轉(zhuǎn)移的溶液體積不要超過(guò) 0.6 mL,否則沒(méi)有空間加溶液 C。
8. 加入 0.2 mL 的氯仿(自備),震蕩器上充分振蕩 30 秒混勻。注意:一定要讓管底的溶液震蕩起來(lái)。
9. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘,小心轉(zhuǎn)移上清到新離心管中。說(shuō)明:離心后兩相交界面將有白色膜狀物,其中有機(jī)相部分顏色較深,一般呈淡棕色。將0.5 mL 上清轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 離心管中。如果有多余的可以棄之不用。
10. 加入 0.8 mL 的溶液 C,上下顛倒 30 秒混勻。
11. 分兩次上柱(即先轉(zhuǎn)移一半的混合液到離心吸附柱中,12000-15000 g 室溫離心半分鐘,棄穿透液,然后再將剩下的混合液到離心吸附柱中,12000-15000g 室溫離心半分鐘,棄穿透液)。
12. 加 0.7 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12000-15000 g 室溫離心半分鐘,棄穿透液。
13. 如果有必要,可以再加 0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中,12000-15000 g室溫離心半分鐘,棄穿透液。增加一步洗滌能使最后得到的 DNA 的純度稍有提高,但產(chǎn)量稍微有所降低。
14. 12000-15000 g 室溫再離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的通用洗柱液會(huì)污染 DNA。
15. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一新的 1.5 mL 塑料離心管中,加入 50-100 uL DNA 洗脫液 2.0。
16. 室溫放置離心吸附柱 1-2 分鐘。
17. 12000-15000 g 室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為 DNA 樣品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
關(guān)鍵字: 柱式糞便DNAout廠家;柱式糞便DNAout現(xiàn)貨
上??道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè),專營(yíng)生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細(xì)胞生物學(xué),分子生物學(xué)等高生物產(chǎn)品??偛课挥谏虾#⒃诒本?、廣東,江西,吉林等全國(guó)30多個(gè)省市設(shè)有分公司和代理機(jī)構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國(guó)科學(xué)院、清華、北大、復(fù)旦,上海交大,復(fù)旦醫(yī)學(xué)院,上海中醫(yī)藥大學(xué),華東師范大學(xué),第二軍醫(yī)大學(xué),曙光醫(yī)院,浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用,可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。