細(xì)胞系
溶解方法
反應(yīng)時(shí)間
應(yīng)用
動(dòng)物模型
劑量
注意事項(xiàng)
References:
Fluorescein -12-dUTP可用于直接酶標(biāo)記DNA / cDNA,如PCR,隨機(jī)引物DNA標(biāo)記反應(yīng),引物延伸,Nick Translation等。它可以作為其天然對(duì)應(yīng)物dTTP的替代物而被整合進(jìn)入DNA/ cDNA。獲得的染料標(biāo)記的DNA / cDNA探針非常適合熒光雜交應(yīng)用 - FISH或基于基因芯片的基因表達(dá)譜分析。與尿苷的C5位連接的優(yōu)化接頭確保了優(yōu)化的底物特性和標(biāo)記效率。推薦用于PCR和Nick Translation的Fluorescein-12-dUTP / dTTP比例:30-50%Fluorescein-12-dUTP / 70-50%dTTP。請(qǐng)注意:保護(hù)染料標(biāo)記的dUTP免受光照,并在低光照條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。染料標(biāo)記的dUTP的終濃度可能取決于實(shí)際應(yīng)用和實(shí)驗(yàn)條件。為了獲得產(chǎn)品收率和高摻入率,建議對(duì)染料標(biāo)記的dUTP / dTTP比率進(jìn)行單獨(dú)優(yōu)化。
Fluorescein-12-dUTP可以作為以下酶的底物:
- Taq聚合酶
- phi29 DNA聚合酶
- DNA聚合酶I(全酶和Klenow片段)
- 末端轉(zhuǎn)移酶
- 逆轉(zhuǎn)錄酶(例如AMV和M-MuLV)。
參考文獻(xiàn):[1]. Wiegant et al. (2001) Probe Labeling and Fluorescence in situ Hybridization. Current Protocols in Cytometry 8:8.3.1.[2]. Yie SM1, Xiao R, et, al. Progesterone regulates HLA-G gene expression through a novel progesterone response element. Hum Reprod. 2006 Oct;21(10):2538-44. Epub 2006 May 9.
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