中文名稱:    異丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷
英文名稱:    Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
CAS號：367-93-1
分子式:    C9H18O5S
分子量:    238.3
EINECS號:    206-703-0
熔點     105 °C
比旋光度     -31 º (c=1, water)
儲存條件     −20°C
水溶解性     soluble
Merck     5082
用途     常用分子生物學(xué)試劑，常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等
用途     是β-半乳糖苷酶和β-半乳糖透酶的誘導(dǎo)劑，不被β-半乳糖苷水解，是硫代半乳糖轉(zhuǎn)酰酶的底物。

IPTG在生物領(lǐng)域用途
IPTG在化學(xué)反應(yīng)中起到作用
IPTG包裝規(guī)格價格等信息
IPTG與β-半乳糖苷酶反應(yīng)關(guān)系

IPTG 使用說明

中文品名: 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷( IPTG)
英文名稱: Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
用途：異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用極強(qiáng)的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定,因此被實驗室廣泛應(yīng)用。IPTG 常用于需要誘導(dǎo) β-半乳糖苷酶活性的克隆實驗。它常與 X-Gal 或 Bluo-Gal 結(jié)合使用，用于重組細(xì)菌菌落的藍(lán)白篩選，這些菌落可以誘導(dǎo) lac 操縱子在大腸桿菌中的表達(dá)。IPTG 與 lacI 阻遏蛋白結(jié)合并改變其構(gòu)象而發(fā)揮作用，防止 β-半乳糖苷酶編碼基因 lacZ 的抑制。
使用方法：首先把IPTG配制成23.83 mg/ml（100 mM）的水溶液，并進(jìn)行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal（20 mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液）和100 μl的Amp（100 mg/ml），制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當(dāng)DNA片段插入至pUC系列載體（或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體），然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細(xì)胞中后，涂布上述的IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基，可根據(jù)長出菌體的藍(lán)白色，而方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。
配制方法：在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG后，用蒸餾水定容至10ml，用0.22μm濾器過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。
優(yōu)點：
1.能誘導(dǎo)酶的合成，但又不被分解的分子，稱為安慰誘導(dǎo)物。由于乳糖雖可誘導(dǎo)酶的合成，但又隨之分解，產(chǎn)生很多復(fù)雜的動力學(xué)問題，因此人們常用安慰誘導(dǎo)物來進(jìn)行各種實驗。
2.IPTG不被菌體代謝，為乳糖類似物，一旦進(jìn)入細(xì)胞就會產(chǎn)生持續(xù)長久的誘導(dǎo)效果，所以IPTG的誘導(dǎo)效率高，往往只需要很少量（1mmol/L）即可達(dá)到理想誘導(dǎo)效果。由于IPTG不被代謝，在胞內(nèi)專一誘導(dǎo)外源蛋白的表達(dá)。不受細(xì)胞代謝的影響，誘導(dǎo)效果持續(xù)穩(wěn)定。乳糖有雙效作用，既能做為誘導(dǎo)劑異乳糖的前體物質(zhì)，又可以做碳源，在誘導(dǎo)過程中，很不穩(wěn)定，IPTG因其優(yōu)異的穩(wěn)定性決定了它適合做實驗研究用。
3.IPTG能在缺乏lacY基因下而有效地被抄送。
4.半乳糖苷鍵中用硫代替了氧，失去了水解活性，但硫代半乳糖苷和同源的氧代化合物與酶位點的親和力相同，IPTG雖不為β-半乳糖苷酶所識別，但它是lac基因簇十分有效的誘導(dǎo)物。
注意事項：培養(yǎng)噬菌體時，Top agar中的添加量為：25 μl/3 ml(24 mg/ml)。含有
                     IPTG   的培養(yǎng)基4℃避光保存，須在1~2 周內(nèi)使用。
保存：2-8°C冷藏保存，配制好后保存于-20°C，室溫可放置一個月。遠(yuǎn)離熱源及氧化劑。

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