過(guò)氧化氫酶(Catalase,CAT)試劑盒說(shuō)明書(shū)
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是最主要的 H2O2 清除酶,在活性氧 清除系統(tǒng)中具有重要作用。
測(cè)定原理:
H2O2在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能夠分解 H2O2,使反應(yīng)溶液 240nm 下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而 下降,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出 CAT 活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1ml 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10 4個(gè)): 提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或 細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰 上待測(cè)。 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提 取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
溫馨提示:本產(chǎn)品不可用于臨床,詳詢客服。
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