錳過氧化物酶(Manganese peroxidase,Mnp)試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
錳過氧化物酶(EC1.11.1.13)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,主要存在于擔子菌中,屬于木質(zhì)素 降解酶系,能有效的降解木質(zhì)素及廢水和土壤中比較難降解的氯化物,疊氮化合物、DTT,多環(huán)芳烴等。
測定原理:
錳過氧化物酶在 Mn 2+存在的條件下,將愈創(chuàng)木酚氧化為四鄰甲氧基連酚,在 465nm 有特征吸收峰。
需自備儀器和用品:
天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
酶液提取:
1、組織:按照質(zhì)量(g):試劑一體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1ml 試劑一) 加入試劑一,冰浴勻漿后于 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。
2、細胞:按照細胞數(shù)量(104 個):試劑一體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1ml 試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 4℃,10000g 離心 10min,取上清置于冰上待測。 3、培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。
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