漆酶（Laccase）試劑盒說明書 

微量法 100T/48S 

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中， 具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常 廣泛的應(yīng)用。 

測定原理： 

漆酶分解底物 ABTS 產(chǎn)生 ABTS 自由基，在 420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物 ABTS，測定 ABTS 自由 基的增加速率，可計(jì)算得漆酶活性。

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。 

酶液提?。?/span>

1、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心 30min，取上清，置冰上待測。

2、細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細(xì)胞加入 1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 4℃，10000g 離心 10min，取上清置于冰上待測。

3、細(xì)胞培養(yǎng)液：直接檢測。