總多糖含量測(cè)定試劑盒說明書 

微量法 100 管/96 樣 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定 

測(cè)定意義：

多糖是生物體中廣泛存在的物質(zhì)，是一類由醛糖或酮糖通過糖苷鍵連接而成的天然高分子多聚物，它 是生物體內(nèi)重要的生物大分子，是維持生命活動(dòng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)的基本物質(zhì)之一。 

測(cè)定原理： 

利用水提醇沉法提取總多糖，苯酚-硫酸法測(cè)定總多糖含量。 

自備儀器和用品：

酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96 孔板、無水乙醇、濃硫酸、蒸餾水、水浴鍋。

總多糖提?。?/span>

樣本烘干粉碎，稱取約 0.05g 樣本，加入 1ml 水，充分勻漿。100℃水浴提取 2h（必須蓋緊蓋子防止 水分流失），冷卻后 10000g 離心 10min，取上清。吸取 0.2ml 上清，慢慢加入 0.8ml 無水乙醇，混勻后 4℃ 靜置過夜，10000g 離心 10min，棄上清，沉淀中加入 1ml 水，充分混勻溶解沉淀。 

測(cè)定步驟：

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 490nm。

2、吸取 200μl 上清，加入 100μl 試劑一和 0.5ml 濃硫酸，混勻后 90℃水浴 20min，流水冷卻。取 200μl 加 入酶標(biāo)板，于 490nm 下測(cè)定吸光值 A。 

3、備注：OD 有效值區(qū)間為 2.5-1.5（若出現(xiàn)測(cè)定管數(shù)值大于 2.5 區(qū)間，可能是樣本的濃度太高，一般將樣 本再用蒸餾水進(jìn)一步稀釋，計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，反之有效值小于 1.5 就增加樣本濃度）