總糖含量試劑盒說(shuō)明書(shū)
分光光度法 50 管/48 樣
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
糖類(lèi)物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一,也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)??偺且部煞Q(chēng)為碳 水化合物,包括可溶性的單糖,二糖以及不溶性的淀粉,纖維素,幾丁質(zhì)等。
測(cè)定原理:
總糖酸水解為還原糖,在 NaOH 和丙三醇存在下,DNS 試劑與還原糖共熱后被還原成氨基化合物,在 過(guò)量的 NaOH 堿性溶液中呈桔紅色,在 540nm 處有最大吸收峰,以此測(cè)定樣品中的總糖含量。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、沸水浴、可調(diào)式移液器、1ml 玻璃比色皿、研缽、蒸餾水。
樣品中總糖的提取:
組織:稱(chēng)取約 0.1g 樣品,加入 1ml 試劑一,1.5ml 蒸餾水,勻漿,95℃水浴中加熱 30min,加入 1ml 試劑二,混勻,用蒸餾水定容至 10ml,8000g 25℃離心 10min,取上清液待測(cè)。(注意稀釋?zhuān)?jiàn)注意事項(xiàng)) 液體樣本:取 0.1ml 樣本,加入 1ml 試劑一,1.5ml 蒸餾水,勻漿,95℃水浴中加熱 30min,加入 1ml 試 劑二,8000g 25℃離心 10min,取上清液待測(cè)。(注意稀釋?zhuān)?jiàn)注意事項(xiàng))
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 540nm,蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至 95 度。
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