Koumine 對人乳腺癌細胞的凋亡作用及其機制。

Koumine 是一種從傳統(tǒng)中草藥 Gelsemium elegans 中分離出來的生物堿。
方法和結(jié)果：
在這項研究中，使用人乳腺癌細胞的提取物研究了抗癌活性和潛在機制。通過 MTT 測定評估的存活率以濃度和時間依賴性方式降低。孵育 48 小時后，通過 Hoechst 33258 染料測定觀察到典型的凋亡形態(tài)變化。流式細胞術(shù)結(jié)果顯示，治療明顯誘導 MCF-7 細胞 G2/M 期阻滯和細胞凋亡。此外，Western blotting 顯示 Bcl-2 蛋白表達下調(diào)，而 Bax 和 caspase-3 表達上調(diào)。
結(jié)論：
因此，我們認為 Koumine 有可能成為未來的乳腺癌化療藥物。

koumine 對體外磁激活細胞分選純化的小鼠 CD4 + T 細胞增殖的影響。

評估磁激活細胞分選從小鼠脾中純化 CD4 + T 細胞的分離效率，并觀察 Koumine 對分離細胞增殖的影響。
方法和結(jié)果：
通過磁激活細胞分選 （MiniMACS） 從小鼠脾臟中分離 CD4 + T 細胞。采用熒光激活細胞分選法測定分離程序前后 CD4+ T 細胞的純度，然后使用臺盼藍染色評估細胞活力。用不同濃度的 Koumine （10-320 μg/ml） 處理伴刀豆球蛋白 A-（ConA，5 μg/ml）或植酸血血凝素 （PHA，1 mg/ml） 誘導的小鼠 T 細胞，MTT 比色法測定其增殖，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定細胞培養(yǎng)上清液中 IL-2 水平。 純化后 CD4+ T 細胞純度達到 （90.3+/-5.8）%，細胞活力為 （94.9+/-3.6）%。與對照組相比，Koumine （20-320 μg/ml） 劑量依賴性地抑制 ConA 或 PHA 誘導的小鼠淋巴細胞增殖 （P<0.05）。與對照組相比，Koumine （20、100 和 200 μg/ml） 顯著降低 IL-2 水平 （P<0.05）。
結(jié)論：
使用 MiniMACS 可以從小鼠脾臟中獲得高純度的 CD4 + T 細胞，而不會損害細胞的活力。Koumine 由于其免疫抑制作用和抑制 IL-2 分泌而顯著抑制小鼠 CD4 + T 細胞的增殖。

鉤吻素子

從 Gelsemium elegans Benth 中提取粗生物堿。產(chǎn)生鎮(zhèn)痛特性。然而，其臨床應用因其狹窄的治療指數(shù)而受到阻礙。
方法和結(jié)果：
在這里，我們研究了 Gumine 的潛力，Gelsemium 生物堿的單體，減輕炎癥和神經(jīng)性疼痛。有趣的是，allopregnanolone 是一種神經(jīng)類固醇，似乎可以介導神經(jīng)性疼痛的減輕。通過乙酸、福爾馬林和完全弗氏佐劑 （CFA） 誘導的小鼠傷害性行為評估 Koumine 的潛在抗炎疼痛作用。慢性縮窄損傷 （CCI） 和 L5 脊神經(jīng)結(jié)扎術(shù) （L5 SNL） 誘導大鼠熱痛覺過敏和機械性異常性疼痛，檢測 Koumine 重復治療是否改善神經(jīng)性疼痛。最后，我們使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法探討了 Koumine 是否改變了 CCI 神經(jīng)病變大鼠脊髓中神經(jīng)類固醇的水平。Koumine 劑量依賴性地降低了小鼠 II 期乙酸誘導的扭動和福爾馬林誘導的舔/咬時間。Koumine 的重復給藥還劑量依賴性地逆轉(zhuǎn)了大鼠 CFA-、CCI 和 L5 SNL 誘導的熱痛覺過敏，以及 CCI 和 L5 SNL 誘導的機械性異常性疼痛。在 CCI 誘導的神經(jīng)性大鼠中，通過重復處理 Koumine 升高 L5-6 脊髓中 allopregnanolone 而不是孕烯醇酮的水平。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，Koumine 在炎癥和神經(jīng)性疼痛的嚙齒動物行為模型中具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，神經(jīng)性疼痛的減輕可能與脊髓中 allopregnanolone 的上調(diào)有關。

koumine 誘導的人結(jié)腸腺癌 LoVo 細胞體外凋亡研究。

體外研究 Koumine 對人結(jié)腸腺癌 LoVo 細胞的凋亡誘導作用。
方法和結(jié)果：
Koumine （50 mmol/L） 體外處理后，分別在光學顯微鏡、透射電子顯微鏡和熒光鏡下檢測 LoVo 細胞凋亡情況，并采用流式細胞術(shù)分析細胞周期分布。 用 Koumine 處理細胞后，凋亡細胞的百分比以時間依賴性方式增加，其作用表現(xiàn)出顯著的細胞周期特異性。G（0）/G（1） 期 LoVo 細胞的百分比從 31.3% 上升到 42.3%，S 期細胞的百分比從 62.0% 下降到 38.7%。
結(jié)論：
Koumine 可以以時間依賴性方式誘導 LoVo 細胞凋亡，抑制 LoVo 細胞中的 DNA 合成，從而阻斷細胞周期從 G1 期到 S 期。

鉤吻素子（一種 Benth 生物堿）在糖尿病神經(jīng)病變大鼠模型中的抗同種異體疼痛和神經(jīng)保護作用。

糖尿病性神經(jīng)病變的特征是與糖尿病相關的神經(jīng)纖維進行性變性?？挂钟羲幒涂贵@厥藥是藥物治療的主要藥物，但對疼痛的核心臨床特征的有效性往往有限。在目前的研究中，我們使用糖尿病神經(jīng)病變的大鼠模型檢查了 鉤吻素子（一種秀麗隱桿線蟲生物堿）的潛在影響。
方法和結(jié)果：
大鼠腹膜內(nèi)給予單劑量鏈脲佐菌素 （60 mg/kg） 誘導 1 型糖尿病。鏈脲佐菌素給藥后 3 周開始，以 0.056-7 mg/kg 的劑量范圍皮下注射 鉤吻素子，持續(xù) 1 周。注射鏈脲佐菌素后每天評估對機械刺激的行為反應。注射鏈脲佐菌素后 4 周，通過電子顯微鏡評估坐骨神經(jīng)的感覺神經(jīng)傳導速度 （SNCV） 和形態(tài)學變化。糖尿病大鼠在注射鏈脲佐菌素后 3 周內(nèi)出現(xiàn)機械性痛覺過敏，并表現(xiàn)出 SNCV 降低和髓鞘/軸突結(jié)構(gòu)受損。糖尿病大鼠的 鉤吻素子治療早在第一次給藥后就減輕了神經(jīng)性疼痛行為。在 7 mg/kg 的劑量下，鉤吻素子比加巴噴丁 （100 mg/kg） 更有效，并將機械敏感性閾值降低到與健康對照相當?shù)乃健?br _istranslated="1" style="margin: 0px; padding: 0px;">結(jié)論：
鉤吻素子重復治療可顯著減輕坐骨神經(jīng)軸突和髓鞘損傷，增加 SNCV，不影響體重和血糖。這些發(fā)現(xiàn)鼓勵使用 Koumine 治療糖尿病神經(jīng)病變。

大鼠肝臟微粒體中的四種新 koumine 代謝物。

方法和結(jié)果：
四種新代謝物 M-1 [1,2,18,19-四脫氫-4-脫甲基-3,17-環(huán)氧-7,20（2H，19H）-環(huán)伏巴生]，M-2 [1,2,4,21,18,19-六脫氫-4-脫甲基-3,17-環(huán)氧-7,20（2H，19H）-環(huán)伏巴生]，M-3 [1,2,18,19-四脫氫-4-脫甲基-4-甲醛-3,17-環(huán)氧-7,20（2H，19H）-環(huán)伏巴生]和M-4 [1,2,4,21,18,19-六脫氫-4-脫甲基-4-氧-3,17-環(huán)氧-7,20（2H，19H）-環(huán)伏巴生]從鉤吻素子的氯仿提取物中分離得到與苯巴比妥處理的大鼠肝臟微粒體一起孵育。M-1、M-2、M-3 和 M-4 的結(jié)構(gòu)通過包括 ESI-TOF-MS、1D 和 2D NMR 實驗在內(nèi)的光譜方法闡明。
結(jié)論：
提出了鉤吻素子的代謝途徑。還在 A549 細胞系中比較了鉤吻素子及其代謝物之間的細胞毒活性。