從 Chan Su 中分離的 telocinobufagin 對體外免疫細(xì)胞活化和細(xì)胞因子分泌的影響。

許多中藥已被用作免疫調(diào)節(jié)劑，用作免疫抑制劑或免疫刺激劑。最近，我們實驗室成功地從 Chan Su （Venenum Bufonis） 的氯仿提取物中分離出單體 遠(yuǎn)華蟾蜍精（TCB）。在本文中，我們評估了該化合物在體外的免疫調(diào)節(jié)作用。
方法和結(jié)果：
我們發(fā)現(xiàn) TCB 單獨給藥或與多克隆 T 細(xì)胞有絲分裂原伴刀豆球蛋白 A （Con A） 和脂多糖聯(lián)合給藥時，顯著刺激脾細(xì)胞增殖。遠(yuǎn)華蟾蜍精顯著增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞和腹膜巨噬細(xì)胞的活化。遠(yuǎn)華蟾蜍精增加脾細(xì)胞群中 CD4、CD8 陽性細(xì)胞的百分比。此外，我們發(fā)現(xiàn) TCB 治療后白細(xì)胞介素-2 （IL-2）、白細(xì)胞介素-12 （IL-12）、干擾素-γ （IFN-γ） 和腫瘤壞死因子-α （TNF-α） 的水平顯著升高，而 Th2 細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-4 （IL-4） 的水平顯著降低。結(jié)果，Th1/Th2 的比率顯著增加。
結(jié)論：
綜上所述，這些結(jié)果表明 TCB 具有潛在的免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用，并表明該化合物可以開發(fā)為一種新型免疫治療劑，用于治療癌癥和其他免疫介導(dǎo)的疾病，并可能在許多地區(qū)成為一種新的免疫調(diào)節(jié)劑。

從蟾蜍 Bufo rubescens 的皮膚分泌物中分離出 bufadienolides marinobufagin 和 telocinobufagin 的抗菌活性。

抗生素耐藥微生物的出現(xiàn)和這些病原體引起的難以治療的感染的增加刺激了旨在鑒定新型抗菌劑的研究。兩棲動物的皮膚分泌物中含有大量的生物活性化合物，包括對微生物執(zhí)行防御機(jī)制的化合物。
方法和結(jié)果：
在本工作中，從巴西蟾蜍 Bufo rubescens 的皮膚分泌物中分離出兩種抗菌蟾蜍內(nèi)酯 遠(yuǎn)華蟾蜍精 （402.1609 Da） 和 marinobufagin （400.1515 Da）。標(biāo)本采集于巴西利亞 （Distrito Federal， Brazil），通過電刺激提取皮膚分泌物，并通過 RP-HPLC 進(jìn)行純化。分子結(jié)構(gòu)和質(zhì)量測定分別通過 （1）H 和 （13）C NMR 和質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行。通過對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的液體生長抑制來發(fā)揮抗菌活性。 大腸桿菌 遠(yuǎn)華蟾蜍精 和 marinobufagin 的最低抑菌濃度分別為 64.0 和 16.0 μg/mL，金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度均為 128 μg/mL。
結(jié)論：
除了抗菌活性外，兩種 bufadienolides 都促進(jìn)了離體青蛙腦室條帶收縮力的增加。

遠(yuǎn)華蟾蜍精（一種源自 Bufo paracnemis 腮腺的腮腺）的藥理作用：與局部麻醉劑布比卡因的比較研究。

將 遠(yuǎn)華蟾蜍精（TCB） 的藥理作用進(jìn)行了比較，TCB 是一種通過 HPLC 從 Bufo paracnemis 腮腺中提取的布法二烯內(nèi)酯，與布比卡因 （BUPI） 誘導(dǎo)的藥理作用。
方法和結(jié)果：
在豚鼠離體回腸上，TCB （10-8 至 10-4 M） 抑制電場刺激 （EFS） 誘導(dǎo)的收縮 （6x10-4 M 時對照反應(yīng)的 0.9 ± 0.9 %）和 ACh 誘導(dǎo)的收縮，呈濃度依賴性方式。BUPI （10-7 至 10-3 M） 也以濃度依賴性方式抑制 EFS 和 ACh 誘導(dǎo)的豚鼠離體回腸收縮。在大鼠離體坐骨神經(jīng)上，TCB （1 mM） 在 15 min 和 30 min 后將復(fù)合動作電位 （CAP） 峰峰值振幅 （PPA） 分別降低至對照振幅的 64.9±7.2 % 和 12.9±4.4 %;45 分鐘后 遠(yuǎn)華蟾蜍精的撤退逆轉(zhuǎn)至 83.2±17.5%。TCB 在 30 分鐘后將 CAP 傳導(dǎo)速度 （CV） 降低至對照的 15.0±15.0 %;洗滌液反轉(zhuǎn)至對照的 78.7±7.2 %。BUPI （1 mM） 在 15 min 和 30 min 后分別抑制 CAP PPA 至對照的 46.7±14.4 % 和 11.8.±6.5 %;洗滌 45 分鐘后，它部分恢復(fù)到 29.7±8.3%。30 分鐘后，BUPI 將 CAP CV 抑制至對照的 17.4±11.2 %;洗滌 45 分鐘后，它部分恢復(fù)到 44.8±14.5%。在大鼠離體心房上，TCB （10-6 至 10-4 M） 不改變自發(fā)性正性肌力，被 BUPI 消除。
結(jié)論：
因此，TCB 顯示出可逆的局部麻醉作用，類似于 BUPI，但在體外無心臟毒性。本研究展示了具有治療意義的局部麻醉活性新分子的研究前景。

遠(yuǎn)華蟾蜍精可增強(qiáng) Th1 免疫反應(yīng)并防止鼠傷寒沙門氏菌感染。

在臨床應(yīng)用中，迫切需要理想的潛在疫苗佐劑來刺激 Th1 免疫反應(yīng)來控制細(xì)胞內(nèi)感染。遠(yuǎn)華蟾蜍精（TBG） 是 Venenum bufonis 的一種活性成分，具有免疫調(diào)節(jié)活性。因此，我們研究了 TBG 是否增強(qiáng)了小鼠對卵清蛋白 （OVA） 和福爾馬林滅活鼠傷寒沙門氏菌 （FIST） 的 Th1 免疫反應(yīng)。
方法和結(jié)果：
TBG 增強(qiáng)血清 OVA 和 FIST 特異性 IgG 和 IgG2a 以及抗原再刺激的脾細(xì)胞產(chǎn)生 IFNγ。TBG 還顯著增強(qiáng)了脾細(xì)胞對伴刀豆球蛋白 A、脂多糖和 OVA 的增殖反應(yīng)，并顯著增加了 OVA 免疫小鼠脾細(xì)胞中的 T-bet mRNA 水平和 CD3（+）/CD3（+）CD4（+）/CD3（+）CD8（+） 表型。在體內(nèi)保護(hù)研究中，TBG 顯著降低了 FIST 免疫小鼠脾臟中的細(xì)菌負(fù)荷，延長了用活鼠傷寒沙門氏菌攻擊的小鼠的存活時間。在TBG/FIST免疫的小鼠中，用抗IFNγ抗體體內(nèi)中和IFNγ導(dǎo)致FIST特異性IgG2a和IFNγ水平以及抗沙門氏菌效應(yīng)顯著降低。
結(jié)論：
總之，這些結(jié)果表明 TBG 增強(qiáng) Th1 免疫反應(yīng)以控制細(xì)胞內(nèi)感染。

一種新的內(nèi)源性洋地黃 telocinobufagin 在終末期腎功能衰竭患者中表現(xiàn)出血漿水平升高。

哺乳動物體液中有幾種潛在的內(nèi)源性洋地黃樣因子 （EDLF），而 marinobufagenin （MBG） 可能是最有效的 EDLF。需要改進(jìn)的分析來確認(rèn)這些代謝物的效力。在本研究中，我們通過高分辨率質(zhì)譜 （MS） 和核磁共振 （NMR） 鑒定了人血漿中的 MBG 和 遠(yuǎn)華蟾蜍精（TCB）。
方法和結(jié)果：
高分辨率 MS 分析顯示 TCB 和 MBG 的分子量與它們各自的理論值相同。使用串聯(lián)質(zhì)譜儀，確定 TCB 的母離子質(zhì)荷比為 403.2，子離子為 349.2。MBG 的質(zhì)荷比為 m/z 383.2 和 m/z 401.2。NMR 研究表明，MBG 和 TCB 的信號與 MS 分析獲得的信號相同。在人血液中，MBG 和 TCB 也通過液相色譜 （LC） 和 MS 鑒定。在 LC/MS 分析中，使用 proscillaridin A 作為內(nèi)標(biāo)。用 Sep-Pak C18 預(yù)處理血漿，然后將 50 μL 施加到 C8 高效液相色譜 （HPLC） 柱中。健康志愿者 MBG 的平均血漿濃度 （0.94 +/- 0.28 ng/mL） 顯著低于接受常規(guī)血液透析的患者 （3.81 +/- 1.92 ng/mL）。健康志愿者中 TCB 的濃度 （1.80 +/- 0.55 ng/mL） 也顯著低于終末腎功能衰竭患者 （6.86 +/- 4.30 ng/mL）。
結(jié)論：
這些結(jié)果表明，主要的 EDLF 是 TCB，因為它的血漿濃度在已報道的內(nèi)源性洋地黃候選物中最高。