簡介

瓊脂糖由D-半乳糖和3,6-內(nèi)醚-L-半乳糖構(gòu)成的鏈狀中性多糖，結(jié)構(gòu)單元中含有羥基官能團(tuán)，易于與結(jié)構(gòu)單元中的氫原子和鏈段周圍水分子形成氫鍵。

主要性質(zhì)

在低溫時，瓊脂糖糖鏈依靠氫鍵作用，以雙螺旋方式相互纏繞，形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，緊密排列，形成凝膠，呈白色渾濁；在高溫時，結(jié)構(gòu)單元中的氫鍵被破壞，以無規(guī)線團(tuán)分散在水中，溶液澄清透明，是一種具有特殊溫度響應(yīng)性的聚合物。

瓊脂糖凝膠性能瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解，溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠，這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖凝膠性能通常用凝膠強(qiáng)度表示。強(qiáng)度越高，凝膠性能越好。質(zhì)量較好的瓊脂糖強(qiáng)度通常在1200克/cm2以上（1%膠濃度）。瓊脂糖的凝膠性是由存在的氫鍵所致，凡是能破壞氫鍵的因素都能導(dǎo)致凝膠性的破壞。

電泳優(yōu)勢

1.瓊脂糖凝膠電泳操作簡單，電泳速度快，樣品不需事先處理就可以進(jìn)行電泳。

2.瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)均勻，含水量大（約占98％~99％），近似自由電泳，樣品擴(kuò)散較自由電流，對樣品吸附極Chemicalbook微，因此電泳圖譜清晰，分辨率高，重復(fù)性好。

3.瓊脂糖透明無紫外吸收，電泳過程和結(jié)果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。

4.電泳后區(qū)帶易染色，樣品極易洗脫，便于定量測定。制成干膜可長期保存。

制備

一種低凝固溫度瓊脂糖的制備方法，包括如下步驟：

(1)將4.0g瓊脂糖粉末于90℃下溶于150mL去離子水中，配制成瓊脂糖溶液；

(2)上述瓊脂糖溶液自然冷卻至82℃后，向其中加入0.9mL硼氫化鈉的氫氧化鈉溶液進(jìn)行還原反應(yīng)15min，反應(yīng)過程中觀察溶液的顏色變化，當(dāng)顏色由淺綠色變?yōu)闊o色透明液體時，終止還原反應(yīng)，硼氫化鈉的氫氧化鈉溶液中，硼氫化鈉的濃度為4.4mol/L，溶劑為10.0～20.0mol/LNaOH溶液；

(3)向步驟(2)所得溶液中加入40mL濃度為3.8mol/L的氫氧化鈉溶液進(jìn)行堿化處理；

(4)將步驟(3)的溶液迅速冷卻至5℃，邊攪拌邊于60min內(nèi)緩慢滴加20～60％(v/v)環(huán)氧Chemicalbook乙烷水溶液至環(huán)氧乙烷在溶液中的濃度為1.0～5.0wt％，再攪拌反應(yīng)60min；

(5)將步驟(4)所得的溶液加熱至70℃，邊攪拌邊滴加3.0mol/L的乙酸溶液調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.2；

(6)邊攪拌邊將45℃的熱異丙醇加入到步驟(5)的溶液中，然后靜置1.0～3.0h進(jìn)行醇沉分級；

(7)將步驟(6)所得的物料經(jīng)離心過濾，得到白色沉淀物，用60％體積濃度的異丙醇浸沒后進(jìn)行粉碎，再以異丙醇洗滌4次，壓榨脫水得濾餅；

(8)將上述濾餅置于55℃的空氣干燥箱中恒溫干燥12.0h后，再粉碎、200目篩網(wǎng)過篩，即得所述低凝固溫度的瓊脂糖，該瓊脂糖的熔化溫度為60.0℃，凝固溫度26.5℃，凝膠強(qiáng)度為265g/cm2。

用途 瓊脂糖可用于脫氧核糖核酸（DNA），脂蛋白和免疫電泳用。生化研究免疫擴(kuò)散等的底物。生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)和微生物學(xué)研究。