貨號：EX1800
規(guī)格：50T/100T/200T
保存：常溫干燥保存，復(fù)檢期為一年。
試劑盒內(nèi)容：
名稱 | 50T | 100T | 200T |
溶膠液 | 50mL | 100mL | 100mL×2 |
漂洗液 | 15mL | 15mL×2 | 15mL×4 |
洗脫液 | 15mL | 30mL | 60mL |
吸附柱 | 50個 | 100個 | 100個×2 |
收集管 | 50個 | 100個 | 100個×2 |
說明書 | 1份 | 1份 | 1份 |
產(chǎn)品說明：
本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合的DNA硅基質(zhì)材料和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)，從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段，同時除去蛋白質(zhì)、其他有機(jī)化合物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。可回收100bp-10kb大小的片段，回收率大于80%（小于100bp和大于10kb的DNA片段回收率為30-50%）。使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等試驗。
注意事項：在使用本試劑盒前請閱讀此注意事項。
1. 電泳前更換成新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。
2. 如下一步實驗要求較高，則應(yīng)盡量使用TAE電泳緩沖液。
3. 切膠時，紫外照射時間應(yīng)盡量短，以免對DNA造成損傷。
4. 回收小于100bp和大于10kb的DNA片段時，應(yīng)加大溶膠液的體積，延長吸附和洗脫的時間。
5. 回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。
6. 如非指明，所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。
操作步驟: （使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽。）
1、 瓊脂糖凝膠電泳后，將單一的目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分），放入干凈的離心管中，稱取重量。
2、 向膠塊中加入3倍體積溶膠液（如果凝膠重為0.1g，其體積可視為100μL，則加入300μL溶膠液），50-55℃水浴放置10min，期間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，以確保膠塊充分溶解。
注意：溶膠時，如果溶膠液變?yōu)榧t色（正常情況下為淡黃色），可向含有DNA的膠溶液中加入10-30μL 3M醋酸鈉（pH5.2）將膠溶液調(diào)為淡黃色，否則將會影響DNA與吸附柱的結(jié)合，影響回收效率。
3、 將上一步所得溶液加入一個吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12000rpm離心30-60秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。
注意：膠塊完全溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱，因為吸附柱在較高溫度時結(jié)合DNA的能力較弱。
4、 向吸附柱中加入600μL漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
5、 向吸附柱中加入600μL漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
6、 12000rpm離心2min，盡量除去漂洗液。將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，防止漂洗液中的乙醇影響后續(xù)的實驗。
7、 將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加適量經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置2min，12000rpm離心1min。
注意：
1)、為了增加回收效率，可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中，12000rpm再次離心1min。
2)、洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30μL，體積過小影響回收效率。
3)、洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5之間。
8、DNA產(chǎn)物-20℃保存。
關(guān)鍵字： DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒;膠回收;DNA瓊脂糖凝膠;
金克隆生物公司位于北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)，主要從事生物醫(yī)藥試劑的研發(fā)和生產(chǎn)，并兼營部分生化試劑和儀器耗材，主營方向有細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、蛋白與免疫、組織學(xué)、微生物培養(yǎng)等相關(guān)試劑與耗材。庫存現(xiàn)貨10000多種，其中我公司自主開發(fā)的分子生物學(xué)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)及檢測試劑、分子免疫學(xué)產(chǎn)品等在質(zhì)量和價格方面具有較大的市場優(yōu)勢，歡迎廣大經(jīng)銷商洽談合作。