本產(chǎn)品含DMSO在內(nèi)的多種保護(hù)劑成分,內(nèi)含的部分保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,
同時(shí)內(nèi)含的另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,
降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量。
本產(chǎn)品的多種保護(hù)劑在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。
產(chǎn)品用途:
1.用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ)。
2.用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存。
3.科研高校,細(xì)胞株凍存。
4.醫(yī)院樣本庫(kù)細(xì)胞樣品保存
使用方法:
1. 凍存前準(zhǔn)備
1)要求凍存細(xì)胞在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)周期,存活率大于90%
2)計(jì)算細(xì)胞密度,一般要求在1-3×106cells/ml
2. 細(xì)胞凍存過(guò)程
1)將要凍存的細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)后離心,800rpm,2min即可
2)棄去上清,將無(wú)血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中,吹打混勻,根據(jù)需要分裝凍存管,建議500μl-1000μl一管。
直接放入-80℃冰箱保存,約24小時(shí)候后轉(zhuǎn)入液氮罐中長(zhǎng)期保存。
3. 細(xì)胞復(fù)蘇過(guò)程
1)提前開(kāi)啟水浴鍋,溫度調(diào)節(jié)到37℃。
2)將凍存的細(xì)胞冷凍管從液氮中取出,迅速置于水浴鍋中融化,盡量1min融化,時(shí)間越短,對(duì)細(xì)胞影響越小。
3)將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速吸出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻,
(如細(xì)胞冷凍保存液為500μl,則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中,如細(xì)胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。)
4)混勻后立即離心,800 rpm,3min即可,離心結(jié)束后棄上清,加入預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液。
5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
備注:
1. 本產(chǎn)品僅供研究使用。
2. 無(wú)特殊毒性,按普通化學(xué)品處理。如果不慎與眼、皮膚和衣物接觸,請(qǐng)立刻用大量清水沖洗,情況嚴(yán)重者請(qǐng)及時(shí)就醫(yī)。
關(guān)鍵字: 無(wú)血清細(xì)胞凍存液/凍存液;
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