細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒
一、產(chǎn)品簡介。
Cell Counting Kit-8，簡稱 CCK-8，主要成份是四唑鹽 WST-8，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成水溶性的 formazan，其顏色深淺程度與細(xì)胞數(shù)量呈正比。因此，CCK-8 試劑常用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性檢測等實(shí)驗(yàn)。
二、運(yùn)輸與存儲(chǔ)條件。
本產(chǎn)品低溫運(yùn)輸，-20 ℃保存，有效期 12 個(gè)月，使用時(shí)存放在 4 ℃，1 個(gè)月內(nèi)用完。
三、特點(diǎn)與優(yōu)勢。
1. 本試劑為即用型試劑，直接加入細(xì)胞培養(yǎng)液中即可使用。
2. 本試劑經(jīng)脫氫酶作用產(chǎn)生水溶性的 formazan，使培養(yǎng)液變成橙黃色，可以直接測定其 OD 值。
3. CCK-8 細(xì)胞毒性低，加入細(xì)胞培養(yǎng)液后可在不同時(shí)間點(diǎn)連續(xù)測定培養(yǎng)液的 OD 值。
四、使用說明。
1. 細(xì)胞培養(yǎng)。胰酶消化法收集細(xì)胞，計(jì)數(shù)后接種于 96 孔板，培養(yǎng)液體積為 100 μL/孔。
2. CCK-8 孵育。在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入 CCK-8 試劑，10 μL/孔，輕輕震蕩，混勻，繼續(xù)培養(yǎng)。
3. 吸光度值檢測。CCK-8 加入后不同時(shí)間點(diǎn)（1h，2h，4h），利用酶標(biāo)儀檢測 450 nm 處吸光度值（OD 值）。
4. 細(xì)胞存活率計(jì)算：
細(xì)胞存活率 (%)=[A(加藥)-A(空白)]/A(對照)-A(空白)]×100
A(加藥)：藥物處理細(xì)胞的吸光度值
A(空白)：利用培養(yǎng)液作為空白對照孔的吸光度值。
A(對照)：正常生長細(xì)胞的吸光度值
五、注意事項(xiàng)。
1. 如果吸光度值偏低則適當(dāng)延長 CCK-8 孵育時(shí)間。
2. 測定吸光度值前應(yīng)確?？變?nèi)沒有氣泡，否則吸光度值會(huì)異常。
3. 若無 450 nm 濾光片，可以使用 420-480 nm 的濾光片。
關(guān)鍵字： 細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒;CCK-8;
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