脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)是一種用于定量檢測人血清和血漿(EDTA或檸檬酸鹽)中脫氫表雄酮(DHEA)的酶聯(lián)免疫吸附測定。該設(shè)備旨在用于診斷具有腎上腺功能減退、男性化、21-羥化酶缺乏癥或多毛癥跡象的個體。該設(shè)備不用于檢測腎上腺腺瘤和腎上腺癌。僅用于研究目的。
艾美捷脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)【#ALP-11-HEAHU-E01】檢測原理:
DHEA ELISA試劑盒是一種基于競爭結(jié)合原理的固相酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)。微孔板表面涂有一層針對DHEA分子抗原位點的多克?。ㄍ茫┛贵w。在第一次孵育過程中,樣本中的內(nèi)源性DHEA與DHEA-辣根過氧化物酶結(jié)合物競爭與包被抗體的結(jié)合位點。孵育完成后,未結(jié)合的結(jié)合物被洗去,固相部分再與底物溶液孵育。通過加入終止液停止顯色反應(yīng),測量生成的黃色產(chǎn)物的吸光度(OD)。顏色的強度與樣本中分析物的濃度成反比。通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(以O(shè)D值為縱軸,標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫軸),可以確定未知樣本的濃度。
所需材料(未提供):
校準(zhǔn)的微孔板讀數(shù)儀(450 nm,參考波長為620至630 nm)
校準(zhǔn)的可變精度微量移液管
手動或自動微孔板清洗設(shè)備
吸水紙
蒸餾水
計時器
半對數(shù)坐標(biāo)紙或數(shù)據(jù)處理軟件
結(jié)果計算:
樣本濃度可以直接從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。
對于重復(fù)測定,必須取每個標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣本的兩個吸光度(OD)值的平均值。如果兩個值差異較大,ALPCO建議重新檢測樣本。
濃度超過最高標(biāo)準(zhǔn)的樣本可以用標(biāo)準(zhǔn)0進一步稀釋,并按照“檢測程序”重新檢測,或者報告為>30 ng/mL。計算濃度時,必須考慮稀釋倍數(shù)。
(例如:1:10稀釋:10 µL樣本 + 90 µL標(biāo)準(zhǔn)0)
自動化方法:
說明書中給出的結(jié)果是通過四參數(shù)邏輯(4PL)曲線擬合自動計算得出的(4PL Rodbard或4PL Marquardt是首選方法)。其他數(shù)據(jù)處理方法可能會得出略有不同的結(jié)果。
手動方法:
使用半對數(shù)坐標(biāo)紙,通過繪制每個標(biāo)準(zhǔn)品的(平均)OD值與其濃度的關(guān)系來構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線(以O(shè)D值為縱軸,濃度為橫軸)。通過每個樣本的(平均)OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上確定相應(yīng)的樣本濃度。
典型標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
以下數(shù)據(jù)僅用于演示,不能替代實際檢測時生成的數(shù)據(jù)。
脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)文獻參考:
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https://www.amyjet.com/products/ALP-11-HEAHU-E01.shtml