PLBL2檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA），用于定量檢測倉鼠（CHO）細(xì)胞樣本中的磷脂酶B樣蛋白2（Phospholipase B-Like 2，PLBL2）。僅供研究使用，不得用于診斷程序。
艾美捷CHO PLBL2 ELISA試劑盒【#41-PLBL2HA-E01】檢測原理：
雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在此檢測中，樣本中的PLBL2與已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗PLBL2抗體發(fā)生反應(yīng)。經(jīng)洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入檢測抗體（生物素偶聯(lián)的抗PLBL2抗體），形成復(fù)合物。洗滌后，加入辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的鏈霉親和素，形成復(fù)合物。再經(jīng)洗滌后，通過加入顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定復(fù)合物。結(jié)合的酶量與樣本中PLBL2的濃度成正比；因此，450 nm處的吸光度是測試樣本中PLBL2濃度的量度?？梢酝ㄟ^標(biāo)準(zhǔn)曲線（由標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建）來估算測試樣本中PLBL2的量，并根據(jù)樣本稀釋情況進(jìn)行校正。
程序限制：
僅供研究使用：不得用于診斷程序。
可靠性和重復(fù)性：當(dāng)完全理解包裝說明書中的信息并遵循良好的實驗室操作規(guī)范時，可以獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果?？赡苡绊憴z測性能的因素包括儀器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質(zhì)量、試劑和樣本的移液準(zhǔn)確性、洗滌技術(shù)以及孵育時間和溫度。不要將不同批次或來源的試劑混合或替換使用。
所需材料（未提供）：
精密移液管（2 µL至1000 µL），用于制備和分裝稀釋液
試管
噴壺或微孔板清洗/吸引器
蒸餾水或去離子水
能在450 nm處讀數(shù)的微孔板讀數(shù)儀
用于制備試劑和緩沖液溶液的各種玻璃器皿
用于樣本收集的離心機(jī)
用于血漿收集的抗凝劑
計時器
微孔板振蕩器
樣本稀釋：
檢測要求每個測試樣本在使用前進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行檢測時，所有樣本都應(yīng)進(jìn)行雙份檢測。推薦的稀釋倍數(shù)僅為建議。稀釋倍數(shù)應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，使得稀釋后的樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本水平，在運行整個板之前，強烈建議對一個或兩個代表性樣本進(jìn)行系列稀釋。在使用前立即稀釋樣本。
CHO培養(yǎng)提取樣本：推薦起始稀釋倍數(shù)為1:20。要制備樣本的1:20稀釋液，將15 µL樣本轉(zhuǎn)移至285 µL的1X稀釋液中。充分混合。
試劑準(zhǔn)備：
恢復(fù)至室溫：使用前將所有試劑恢復(fù)至室溫（16℃至25℃）。
稀釋液：直接使用。
洗滌液濃縮液：提供的洗滌液為20X濃縮液，需用蒸餾水或去離子水稀釋1:20（1份濃縮液，19份水）。當(dāng)儲存溫度較低時，濃縮液中可能會出現(xiàn)結(jié)晶。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35℃可以溶解結(jié)晶。
檢測抗體：根據(jù)每條微孔板檢測條的需求，將10 µL檢測抗體加入990 µL 1X稀釋液中，制備工作液。使用前立即稀釋，避免光照。均勻混合，但動作要輕柔，避免起泡。
HRP-鏈霉親和素：根據(jù)每條微孔板檢測條的需求，將10 µL HRP-鏈霉親和素加入990 µL 1X稀釋液中，制備工作液。使用前立即稀釋，避免光照。均勻混合，但動作要輕柔，避免起泡。
預(yù)包被ELISA微孔板：直接使用。打開鋁箔袋，取出微孔板。將不用于檢測的檢測條和孔放回袋中，并與干燥劑一起重新密封。
倉鼠（CHO）PLBL2校準(zhǔn)品：根據(jù)批次特定的分析證書進(jìn)行準(zhǔn)備。
https://www.amyjet.com/products/ALP-41-PLBL2HA-E01.shtml