肺炎支原體可引起嚴重的呼吸道感染、肺外疾病,嚴重威脅兒童的健康。肺炎支原體的診斷方法包括分離培養(yǎng)、抗體檢測、熒光定量PCR等檢測方法。但是現(xiàn)有檢測方法在時間、成本、方便性和靈敏性方面存在缺點。 在本研究中,鄧老師(鄧仲良)課題組開發(fā)了ERA/ CRISPR-Cas12a雙系統(tǒng),可以快速檢測肺炎支原體,該方法具有快速,靈敏,特異性高、經(jīng)濟的特點。該系統(tǒng)利用LbCas12a蛋白的高特異性和側(cè)切活性,結合擴增能力強的酶重組擴增(ERA)技術,使結果可以在便攜式熒光儀上觀察或用蘸液棒肉眼觀察,可以在大約30分鐘內(nèi)得到。ERA/ CRISPR-Cas12a熒光和試紙系統(tǒng)能檢測肺炎支原體滴度分別低至1拷貝/mL和100拷貝/mL。 兩種檢測方法特異性均為100%,與其他病原菌無交叉反應。 在評估92份臨床樣本中,ERA/ CRISPR-Cas12a熒光和試紙系統(tǒng)與熒光定量pcr檢測法陽性預測符合率分別為100%和92.86%。 兩種方法的陰性預測符合率均為100%。 本研究中建立的檢測方法,便攜、快速、低成本、超靈敏、高特異,適用于早期、快速診斷肺炎支原體,滿足現(xiàn)場快速檢測。
上海惠誠生物科技有限公司,成立于2010年,企業(yè)宗旨“惠質(zhì)產(chǎn)品,摯誠服務”?;菡\生物致力于成為一站式科學服務商,產(chǎn)品覆蓋設計開發(fā)過程,提供實驗室設計、實驗室建設、儀器設備、耗材、物資管理、試劑、技術服務等專項配套服務?;菡\生物在上海建立研發(fā)中心,在湖北和江蘇有生產(chǎn)基地,在廣州和深圳建立子公司,立足上海,銷售網(wǎng)絡遍布全國,為客戶提供全方位的綜合服務。
CRISPR是一種出色的基因組編輯工具,比較熟悉的是來自化膿鏈球菌的Cas9(SpCas9),不過這并不是唯一的選擇。一種新型核酸酶Cas13a(以前稱為C2c2)正開始進入人們的視野,它具有獨特的性質(zhì),進一步擴展了CRISPR工具箱。
惠誠生物提供的提供的cas酶包括:
CRISPR-Cas13a
重組CRISPR-Cas12a蛋白 Recombinant CRISPR-Cas12a protein
重組CRISPR-Cas9蛋白 Recombinant CRISPR-Cas9 protein
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