進(jìn)口藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)《比索洛爾氨氯地平片-JX20210038》雜質(zhì)AML-2的化學(xué)式結(jié)構(gòu)有誤，QCS可提供正確的AML-2雜質(zhì)，保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)中RRT結(jié)果一致。

從公開(kāi)信息可知，比索洛爾氨氯地平片目前過(guò)評(píng)企業(yè)有兩家，苑東(成都碩德)和石家莊四藥，而山東新時(shí)代藥業(yè)、北京福元醫(yī)藥、浙江花園藥業(yè)、天大藥業(yè)(珠海)、山東齊都藥業(yè)、江西施美藥業(yè)等十余家藥企以新注冊(cè)分類(lèi)提交了比索洛爾氨氯地平片的上市申請(qǐng)，均在審評(píng)審批中。

AML-2雜質(zhì)是進(jìn)口藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)《比索洛爾氨氯地平片-JX20210038》中所收錄的雜質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)中宣稱(chēng)的結(jié)構(gòu)式為：N-(2-{[4-(2-氯苯基)-3-(乙氧基羰基)5-(甲氧基羰基)-6-甲基-1,4-二氫吡啶-2-基]甲氧基}乙基)天冬氨酸(圖1-左)，該結(jié)構(gòu)對(duì)應(yīng)QCS標(biāo)準(zhǔn)品編號(hào)為RM-A131257（圖1-右）。

圖1：進(jìn)口藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)中宣稱(chēng)的AML-2結(jié)構(gòu)式

近期接到客戶反饋，在使用標(biāo)稱(chēng)結(jié)構(gòu)N-(2-{[4-(2-氯苯基)-3-(乙氧基羰基)5-(甲氧基羰基)-6-甲基-1,4-二氫吡啶-2-基]甲氧基}乙基)天冬氨酸(CAT No: RM-A131257; Amlodipine Impurity 57 (Amlodipine Aspartic Acid Impurity); CAS NO: 400602-35-9)對(duì)樣品中AML-2進(jìn)行研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常結(jié)果——該結(jié)構(gòu)(CAT No: RM-A131257)在標(biāo)準(zhǔn)條件下進(jìn)行液相色譜研究進(jìn)行研究時(shí)，其結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)方法下典型色譜圖中AML-2的峰對(duì)應(yīng)不上。

根據(jù)客戶反饋“使用進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)中所宣稱(chēng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行系統(tǒng)適用性考察，除比索洛爾氨地平加成雜質(zhì)AML-2外，其余五個(gè)雜質(zhì)出峰順序與相對(duì)保留時(shí)間與進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)基本一致”。但是標(biāo)準(zhǔn)中雜質(zhì)AML-2相對(duì)保留時(shí)間應(yīng)為1.27，該結(jié)構(gòu)樣品實(shí)測(cè)值為1.0左右(樣品峰與API峰幾乎重合)。即使更換不同色譜柱進(jìn)行測(cè)試，色譜結(jié)果未有明顯改變——除AML-2外其余雜質(zhì)出峰順序與相對(duì)保留時(shí)間與進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)基本一致，待研究的AML-2出峰異常（圖2為客戶反饋的檢測(cè)數(shù)據(jù)）。

圖2：客戶標(biāo)準(zhǔn)方法下各雜質(zhì)的檢測(cè)數(shù)據(jù)(唯獨(dú)AML-2數(shù)據(jù)異常)

接到反饋后，我中心快速響應(yīng)，立刻成立調(diào)查小組，對(duì)使用QCS標(biāo)準(zhǔn)品RM-A131257在進(jìn)行氨氯地平和比索洛爾加成雜質(zhì)(進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)雜質(zhì)編號(hào): AML-2)的研究中引起的異常結(jié)果進(jìn)行研究。

進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)中所宣稱(chēng)的AML-2結(jié)構(gòu)為氨氯地平和富馬酸加合物（參考圖1）。因此，我們對(duì)該結(jié)構(gòu)式對(duì)應(yīng)的產(chǎn)品(CAT No: RM-A131257)進(jìn)行了檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行復(fù)核，其核磁共振波譜和質(zhì)譜數(shù)據(jù)與目標(biāo)結(jié)構(gòu)吻合，結(jié)構(gòu)確證無(wú)誤（產(chǎn)品數(shù)據(jù)如圖3）。

圖3：AML-2標(biāo)稱(chēng)結(jié)構(gòu)對(duì)應(yīng)產(chǎn)品的檢測(cè)數(shù)據(jù)和報(bào)告

確認(rèn)產(chǎn)品結(jié)構(gòu)無(wú)誤后，QCS研發(fā)中心對(duì)客戶反饋的液相結(jié)果進(jìn)行了復(fù)驗(yàn)。然而，我們按進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)(比索洛爾氨氯地平片JX20210038)有關(guān)物質(zhì)方法檢測(cè)，得到了跟客戶一樣的結(jié)果——AML-2并未按標(biāo)準(zhǔn)收錄的RRT1.2左右出現(xiàn)，反倒是跟氨氯地平的RT非常接近（圖4是AML-2標(biāo)準(zhǔn)收錄描述，圖5是AML-2按標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)的圖譜數(shù)據(jù)）。

圖4: 標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于AML-2的RRT和校正因子的描述

圖5:我中心按標(biāo)準(zhǔn)條件檢測(cè)氨氯地平和AML-2雜質(zhì)的色譜圖

數(shù)據(jù)顯示，氨氯地平API的RT為19.27min，現(xiàn)有所謂AML-2樣品RT是19.37，與API十分接近。甚至，通過(guò)嘗試不同色譜柱，該結(jié)構(gòu)的液相色譜結(jié)果最好的分離效果也僅僅是RRT能到1.02，遠(yuǎn)沒(méi)有達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)收錄的RRT=1.2左右。

以該樣品所測(cè)得液相色譜結(jié)果與進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)中的結(jié)果不符，但是QCS標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研發(fā)中心經(jīng)過(guò)反復(fù)核對(duì)，確認(rèn)該樣品與標(biāo)準(zhǔn)中所畫(huà)的結(jié)構(gòu)是一致的。那么我們不禁開(kāi)始懷疑，進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)中的AML-2宣稱(chēng)結(jié)構(gòu)式是不是錯(cuò)了？

即：比索洛爾氨氯地平復(fù)方中存在一個(gè)相對(duì)保留時(shí)間1.27編號(hào)為AML-2的雜質(zhì)，但該雜質(zhì)并不是標(biāo)準(zhǔn)中所畫(huà)的N-(2-{[4-(2-氯苯基)-3-(乙氧基羰基)5-(甲氧基羰基)-6-甲基-1,4-二氫吡啶-2-基]甲氧基}乙基)天冬氨酸(CAT No: RM-A131257)，真實(shí)的AML-2雜質(zhì)另有其真正的結(jié)構(gòu)式！

那標(biāo)準(zhǔn)收錄的AML-2到底是何方神圣呢?

很幸運(yùn)我們找到了AML-2雜質(zhì)的真正結(jié)構(gòu)！

通過(guò)客戶的數(shù)據(jù)反饋以及我們對(duì)現(xiàn)有的“AML-2”的獨(dú)家研究資料。在經(jīng)過(guò)數(shù)月的研究，終于在數(shù)百份試驗(yàn)樣品中讓我們找到了AML-2的真兇，并制得了正確的AML-2標(biāo)準(zhǔn)品。

對(duì)于未知的探索過(guò)程往往是枯燥而乏味的，但是對(duì)于最終找到產(chǎn)品產(chǎn)生的機(jī)理并驗(yàn)證我們想法的正確時(shí)，那種柳暗花明的感覺(jué)非言語(yǔ)所能表達(dá)。近2個(gè)月的探索，我們最終如愿拿到了正確的AML-2產(chǎn)品。

以最新生產(chǎn)的AML-2標(biāo)樣與氨氯地平、AML-1混合進(jìn)樣數(shù)據(jù)顯示——真實(shí)的AML-2結(jié)構(gòu)樣品出峰順序與進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)一致，AML-2與氨氯地平的相對(duì)保留時(shí)間(RRT)計(jì)算值是1.27(24.678/19.412=1.27)與標(biāo)準(zhǔn)收錄的相對(duì)保留時(shí)間相符。

圖6：AML-1,AML-2與氨氯地平混合進(jìn)樣數(shù)據(jù)

從真假AML-2與API的保留時(shí)間對(duì)比看，我們有理由懷疑進(jìn)口注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)(比索洛爾氨氯地平片JX20210038)中所收錄的AML-2的結(jié)構(gòu)不對(duì)，而是“另有其人”。

綜上所述，通過(guò)本次驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)中收錄的結(jié)構(gòu)與色譜圖中是不一致的，應(yīng)該做這個(gè)項(xiàng)目的客戶都有此疑問(wèn)，歡迎客戶向我們索取小樣以驗(yàn)證AML-2的準(zhǔn)確性。