INVSc1菌株是專門用來做重組蛋白表達的宿主酵母，pYES2質(zhì)粒與INVSc1酵母配套使用，激活pYES2質(zhì)粒的GAL1啟動子的轉(zhuǎn)錄進而啟動下游重組蛋白的表達。INVSc1為合子型，可直接通過PEG/LiAc將pYES2質(zhì)粒轉(zhuǎn)化進入INVSc1細胞內(nèi)。質(zhì)粒pYES2的篩選標志為URA，可用SD-URA板進行篩選。INVSc1感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，-80℃可保存三個月，pYES2質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>104 cfu/μg DNA。INVSC1是釀酒酵母菌株，屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養(yǎng)菌株污染，往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來抑制細菌菌的污染和生長。1.取100μl冰上融化的INVSc1感受態(tài)細胞，依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒2-5μg，Carrier DNA(95-100℃，5 min，快速冰浴，重復(fù)一次)10μl，PEG/LiAc 500μl并吸打幾次混勻，30℃水浴30 min(15 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。 2.將管放42℃水浴15 min(7.5 min時翻轉(zhuǎn)6-8次混勻)。 3.5000 rpm離心40 s棄上清，ddH2O 400μl重懸，離心30s棄上清。 4.ddH2O 50μl重懸，涂質(zhì)粒篩選用：SD-U medium板，29℃培養(yǎng)48-96 h。 釀酒酵母適宜的生長溫度是28-30度，一般使用30度培養(yǎng)，溫度超過32度可能導(dǎo)致細胞的死亡。