三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖，只能利用葡萄糖的細(xì)菌，葡萄糖被分解產(chǎn)酸使斜面先變黃，但因量少，生產(chǎn)的少量酸。因接觸空氣而氧化，加之細(xì)菌生長(zhǎng)利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故斜面后來(lái)又變紅。底部由于厭氧狀態(tài)，酸類(lèi)不被氧化，仍保持黃色。而發(fā)酵乳糖的細(xì)菌，則產(chǎn)生大量的酸，使整個(gè)培養(yǎng)基呈黃色。另外，因某些細(xì)菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng)生成黑色的硫化亞鐵沉淀。