XL1-BLUE感受態(tài)細胞
中文名稱 | XL1-BLUE感受態(tài)細胞 |
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中文同義詞 | XL1-BLUE感受態(tài)細胞 |
英文名稱 | EPICURIAN COLI(R) XL1-BLUE COMPETENT CELLS |
英文同義詞 | XL1-BLUE COMPETENT CELLS;EPICURIAN COLI(R) XL1-BLUE COMPETENT CELLS;XL1-Blue Competent Cell |
CAS號 | |
分子式 | |
分子量 | 0 |
EINECS號 | |
相關類別 | 載體與菌株 |
Mol文件 | Mol File |
結構式 |
XL1-BLUE感受態(tài)細胞 性質
XL1-BLUE感受態(tài)細胞是采用大腸桿菌XL1-Blue菌株經特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞,可用于DNA的化學轉化。使用pUC19質粒檢測,轉化效率可達107,-70℃保存幾個月轉化效率不發(fā)生改變。
1.XL1-Blue感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
XL1-Blue菌株能保證高拷貝質粒穩(wěn)定復制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質粒DNA的提取。