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葉綠素 B的測(cè)定和性質(zhì)

2025/2/11 9:57:56 作者:電離式

介紹

葉綠素 B的分子式為C??H??MgN?O?,外觀為綠色晶體。它是光系統(tǒng)II(PSII)的重要組成部分,參與水的光解反應(yīng),產(chǎn)生氧氣和質(zhì)子。

葉綠素 B.png

葉綠素 B

提取

綠寶石甜瓜和菠菜樣品,取可食部分經(jīng)勻漿機(jī)勻漿后,儲(chǔ)存于樣品瓶中。黑米樣品經(jīng)高速粉碎機(jī)粉碎后,儲(chǔ)存于樣品瓶中,樣品現(xiàn)用現(xiàn)制備。稱取樣品于50 mL離心管中,液體試樣加入無(wú)水硫酸鈉1 g,固體試樣不需要加無(wú)水硫酸鈉,然后加入0.1%BHT甲醇溶液15 mL,渦旋混勻,超聲提取2 min,8000 r/min離心5 min,將上層溶液轉(zhuǎn)移至150 mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶?jī)?nèi),重復(fù)提取3次,合并提取液于蒸發(fā)瓶?jī)?nèi)。將蒸發(fā)瓶接在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上,40 ℃水浴減壓蒸餾,待瓶中萃取液剩下約2 mL時(shí),取下蒸發(fā)瓶,立即用氮?dú)獯抵两伞S?.1%BHT甲醇溶液洗出蒸餾瓶中的組分,轉(zhuǎn)移到5 mL容量瓶中,用0.1%BHT甲醇溶液定容。溶液過(guò)0.45 μm有機(jī)系微孔濾膜后,采用高效液相色譜儀測(cè)定。根據(jù)樣品中葉綠素 A和葉綠素 B的含量進(jìn)行稀釋[1]。

熒光性質(zhì)

在CCl4、和丙酮溶液中葉綠素 B自然光照后,熒光強(qiáng)度均會(huì)減弱,在自然光下放置同樣的時(shí)間,在CCl4溶液中熒光強(qiáng)度減弱的程度要比在丙酮溶液中大,在丙酮溶液中相對(duì)較為穩(wěn)定。原因是由于它在光照時(shí)會(huì)發(fā)生光解作用;溶劑介電常數(shù)越小,光解作用越大, 因此它在介電常數(shù)較小的CCl4溶液中最不穩(wěn)定,光解較為完全。隨著溫度的升高,它的熒光強(qiáng)度從731a.u.變化到712a.u,熒光強(qiáng)度略有減小,可能是在恒溫加熱的過(guò)程中有一部分葉綠素 B發(fā)生了光解,但是總的來(lái)看,溫度對(duì)葉綠素B的熒光強(qiáng)度影響輕微。熒光是第一激發(fā)態(tài)最低振動(dòng)能級(jí)的電子向基態(tài)躍遷時(shí)產(chǎn)生的,在濃度較低的情況下,溫度對(duì)于電子的躍遷沒有產(chǎn)生明顯的影響[2]。

參考文獻(xiàn)

[1]孔凡華,趙玥,賈瑞勤,等.高效液相色譜法測(cè)定食品中葉綠素a和葉綠素b的含量[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2024,15(18):313-320.

[2]張懷斌,馬麗英,李懷祥,等.不同條件下葉綠素B的熒光性質(zhì)研究[J].棗莊學(xué)院學(xué)報(bào),2009,26(02):73-75.

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