異硫氰酸熒光素酯,英文名為Fluorescein isothiocyanate,常溫常壓下為黃色至淺黃色固體粉末,它不溶于水但是可溶于常見的有機溶劑包括乙酸乙酯,二氯甲烷和氯仿等。異硫氰酸熒光素酯能與各種抗體蛋白結(jié)合,結(jié)合后的抗體不喪失與一定抗原結(jié)合的特異性,并在堿性溶液中仍有強烈綠色熒光,可對由地細菌病毒和寄生蟲等所致疾病進行快速診斷,主要用于醫(yī)學,農(nóng)學和畜牧等方面。
圖1 異硫氰酸熒光素酯的性狀圖
特性
異硫氰酸熒光素酯的形態(tài)為黃色粉末,有吸濕性,是一種生化試劑,也是醫(yī)學診斷藥物,可對由地細菌病毒和寄生蟲等所致疾病進行快速診斷。異硫氰酸熒光素酯有兩種異構(gòu)體,其中異構(gòu)體Ⅰ型在效率、穩(wěn)定性與蛋白質(zhì)結(jié)合力等方面都更優(yōu)良。FITC分子量為389.4,最大吸收光波長為490~495nm,最大發(fā)射光波長為520~530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年,是應用最廣泛的熒光素。異硫氰酸熒光素酯的主要優(yōu)點是人眼對黃綠色較為敏感,通常切片標本中的綠色熒光少于紅色。
化學應用
異硫氰酸熒光素酯是生物學中應用最為廣泛的一種綠色熒光素衍生物,異硫氰酸熒光素酯具有高吸收率和優(yōu)良的熒光量子產(chǎn)率等特點。異硫氰酸熒光素酯的異硫氰酸基團可與蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結(jié)合,從而實現(xiàn)包括抗體,凝集素在內(nèi)的蛋白標記。FITC 除了用作蛋白質(zhì)標記物,還可用作蛋白質(zhì)熒光示蹤劑,通過標記抗體而快速鑒定病原體,或是用于蛋白質(zhì)和多肽(HPLC)的微量測序。異硫氰酸熒光素酯的最大激發(fā)波長為 494 nm。一旦激發(fā),在最大發(fā)射波長 520 nm 處呈黃-綠色熒光。此外,異硫氰酸熒光素酯也是一種能誘發(fā)接觸超敏反應 (CHS) 的半抗原,并誘導特應性皮炎模型。[1]
參考文獻
[1] 黃春保,慈云祥,常文保.異硫氰酸熒光素-牛血清白蛋白標記物的化學發(fā)光反應[J].分析化學,2002,30:3.