背景^[1-6]

Hsp105 Rabbit Monoclonal Antibody(hsp105兔單克隆抗體)是用hsp105抗原對家兔進(jìn)行免疫后篩選出只產(chǎn)生的hsp105的B淋巴細(xì)胞，再將B細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)與骨髓瘤雜交然后篩選出只分泌hsp105抗體的雜交細(xì)胞，最后通過層析柱純化制的高純度的hsp105兔單克隆抗體。

熱休克蛋白(HSPs)由一組高度保守、表達(dá)豐富的蛋白組成多種功能，包括多蛋白復(fù)合物的組裝和分離，新生蛋白的轉(zhuǎn)運多肽鏈跨細(xì)胞膜和調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)折疊。熱休克蛋白(也稱為熱休克蛋白)作為分子伴侶)一般分為六科:hsp90、hsp70、hsp60、低分子量HSP、免疫親和hsp110家族。

Hsp110家族(也稱為hsp105家族)是由hsp105、Apg-1和Apg-2組成。hsp105是一種睪丸特異性蛋白，與hsp90相關(guān)。研究表明hsp105特異性定位于生殖細(xì)胞中，受熱后可移位至細(xì)胞核內(nèi)沖擊。hsp105可能參與了腫瘤細(xì)胞質(zhì)中p53蛋白的穩(wěn)定生殖細(xì)胞，防止p53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。HSP105(也稱為HSP110)家族由HSP105、Apg-1和Apg-2組成。一半的家庭由HSP90α、HSP90βGRP94。HSP70家族由HSP70、HSC70、GRP78和GRP75組成。低分子量hsp包括HSP10、HSP25、HSP27和HSP32。

HSP56和FKBP12是免疫親和蛋白，與免疫抑制藥物結(jié)合。HSP可提高細(xì)胞的應(yīng)激能力，特別是耐熱能力。預(yù)先給生物以非致死性的熱刺激，可以加強(qiáng)生物對第二次熱刺激的抵抗力，提高生物對致死性熱刺激的存活率，這種現(xiàn)象稱為熱耐受。對此現(xiàn)象的分子機(jī)制仍不太清楚，但許多研究均發(fā)現(xiàn)了HSP的生成量與熱耐受呈正相關(guān)。HSP還可調(diào)節(jié)Na+-K+-ATP酶的活性。

某些細(xì)胞經(jīng)熱休克喪失的Na+-K+-ATP酶活性可在3℃培養(yǎng)中隨著HSP的產(chǎn)生而得到部分恢復(fù)。HSP的誘導(dǎo)劑亞砷酸鈉亦可使Na+-K+-ATP酶的活性升高。這種現(xiàn)象可被放線菌素D和環(huán)已酰亞胺抑制，提示Na+-K+-ATP酶活性升高是一種基因表達(dá)的結(jié)果，而不是亞砷酸鈉直接作用的結(jié)果。

應(yīng)用^[7][8]

Hsp105兔單克隆抗體可用于模型動物或細(xì)胞動態(tài)蛋白質(zhì)組學(xué)研究：

在PSI誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞帕金森病模型的動態(tài)蛋白質(zhì)組學(xué)研究中采用MTT及熒光染色法檢測PSI對PC12細(xì)胞的毒性作用;首次采用熒光差異凝膠電泳(DIGE)和質(zhì)譜(MS)技術(shù)分析PSI引起的動態(tài)蛋白質(zhì)組學(xué)改變。本研究成功地建立了PSI誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞帕金森病(PD)模型,比較全面地復(fù)制出PD細(xì)胞自噬、細(xì)胞凋亡、包涵體形成的病理特征。

首次發(fā)現(xiàn)并鑒定了PSI誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞PD模型動態(tài)蛋白質(zhì)組學(xué)改變。通過DIGE和MS,鑒定出39個差異表達(dá)的蛋白點,它們是27種不同基因的表達(dá)產(chǎn)物。本研究已鑒定的27種蛋白中氧調(diào)節(jié)蛋白150前體、熱休克蛋白105、熱休克蛋白4、結(jié)構(gòu)型熱休克同源蛋白70擬基因蛋白1、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白58、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白75、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94、酪氨酸羥化酶、26S蛋白酶體亞單位ATP酶2、類26S蛋白酶體亞單位p40.5、醛還原酶、細(xì)胞角蛋白8、血紅素加氧酶-1、泛素羧基末端水解酶PGP9.5、鈣激活蛋白酶共15種蛋白表達(dá)上調(diào)(p<0.05或p<0.01),外周蛋白、F1-ATP合成酶、actin cytoplasmic 2、Asnal、14-3-3蛋白、T-complex protein 1 alpha subunit、α-微管蛋白6、過氧化物還原酶2、過氧化物還原酶4、ERp29共10種蛋白表達(dá)下降(p<0.05或p<0.01)。

除此之外,點936、952同為p47蛋白,但點936表達(dá)升高(p<0.05或p<0.01),點952表達(dá)下降(p<0.05);點598、1316、1351都是HSP27蛋白,但點598表達(dá)增加(p<0.01)而點1316、1351表達(dá)下降(p<0.05),這可能與同種蛋白的不同修飾狀態(tài)有關(guān)。已鑒定的蛋白質(zhì)中有7種蛋白表現(xiàn)為兩種或兩種以上的同功體(isform)。如蛋白點36、37、38,點174、178、183、185、186,點252、253,點275、281,點471、475,點936、952,點598、1316、1351,它們的分子量相當(dāng),等電點間隔相同,而且各點的質(zhì)譜鑒定結(jié)果完全一致,提示同一種蛋白的一系列蛋白點可能代表不同的翻譯后修飾。

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