背景及概述
鏈霉親和素(Streptavidin,簡稱SA)是一種具有類似親和素特性的蛋白質(zhì),能夠抵抗蛋白酶消化、極端pH和溫度。生物素-鏈霉親和素復(fù)合物是常用的標志物之一,可用于結(jié)合蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和合成分子,如熒光標記。在樣本制備領(lǐng)域,鏈霉親和素是許多純化系統(tǒng)的核心組成部分,并在WB、IHC、ISH、流式細胞術(shù)、化學(xué)發(fā)光等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用[1]。
特性
鏈霉親和素是一種分子量約為65kDa,等電點為6.0的分泌性蛋白質(zhì),從鏈霉菌Streptomyces Avidinii培養(yǎng)物中提取而來。它是一個四聚體蛋白,可以與生物素高度特異性地結(jié)合。鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)非常低,是一種非常理想的生物素結(jié)合蛋白,適用范圍比親和素更廣泛,因此在生物學(xué)上得到廣泛應(yīng)用。
圖1 鏈霉親和素結(jié)構(gòu)示意圖
應(yīng)用領(lǐng)域
鏈霉親和素具有與生物素特異結(jié)合的能力,并能與辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶、熒光基團等結(jié)合。由于鏈霉親和素的等電點較低,它參與了免疫學(xué)中的檢測信號放大,廣泛應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光、IHC、WB、IF、ISH、流式、核酸提取、蛋白純化等實驗,以及親和色譜填料的制備、生物傳感器和生物芯片的制作。
制法及安全信息
鏈霉親和素的制法一般有兩種:化學(xué)法和生物法?;瘜W(xué)法主要是采用特定的化學(xué)方法將親和性結(jié)構(gòu)單元與高分子載體結(jié)合,形成鏈霉親和素。生物法則是通過基因工程技術(shù)將親和結(jié)構(gòu)單元的基因插入到合適的表達系統(tǒng)中,通過表達和純化獲得鏈霉親和素。
鏈霉親和素的安全信息:它是一種合成的高分子化合物,不具有明顯的毒性和危害性。在處理和處理廢棄物時,應(yīng)按照相關(guān)規(guī)定進行妥善處理,以防止對環(huán)境造成污染。
參考文獻
[1]Green, NM. Avidin. Advances in protein chemistry. 1975, 29: 85–133.