背景技術(shù)

白僵菌素（beauvericin，BEA）是從真菌球孢白僵菌（Beauverla bassiana）發(fā)酵菌絲體中提取分離的一種六元環(huán)狀縮酯肽化合物，由3個(gè)N-甲基苯丙氨酸和3個(gè)(D)-α- 羥基異戊酸殘基交替相連而成，分子式為C45H57N3O9。白僵菌素為白色粉末狀，不易溶于水，溶于甲醇、丙酮等有機(jī)溶劑，可被檢測(cè)的紫外吸收光譜范圍是204nm-225nm。

白僵菌素是一種具有抗菌、殺蟲、抗病毒、抗癌、抑制膽甾醇酰基轉(zhuǎn)移酶活性、引發(fā)細(xì)胞程序性凋亡等生物活性的脂肽類化合物。目前，白僵菌素主要用作除菌劑和殺蟲劑等。在抗菌方面，白僵菌素對(duì)一些革蘭氏陰性菌（大腸桿菌、根癌土壤桿菌、黃瓜角斑病菌、番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病菌）和十幾種革蘭氏陽(yáng)性菌（枯草芽孢桿菌、雙歧桿菌、真桿菌、消化鏈球菌、溶血葡萄球菌）有一定的抑制作用。在殺蟲方面，白僵菌素對(duì)蚊子幼蟲、鹵蟲、綠頭蒼蠅和鞘翅目害蟲等有殺傷作用，白僵菌素其同系物具有抗結(jié)核和瘧原蟲的活性等。

生物活性

近年來(lái)，越來(lái)越多的研究表明白僵菌素除了具有殺蟲作用之外還具有很多生物活性。在抗病毒方面，白僵菌素通過抑制HIV-1整合酶產(chǎn)生抗艾滋病毒作用。在抗真菌方面，白僵菌素配合酮康唑使用有顯著的抗真菌效果，能夠明顯減少酮康唑的用量，降低其毒性。在抗癌方面，白僵菌素能夠誘導(dǎo)人白血病細(xì)胞和人肺癌細(xì)胞的凋亡，可引起鼠和人類腫瘤細(xì)胞系顯著的細(xì)胞死亡，并且能夠強(qiáng)效和特異地抑制鼠肝臟微體中膽固醇?；D(zhuǎn)移酶活性。

作為一個(gè)有潛力的抗菌劑和殺蟲劑，白僵菌素將越來(lái)越多地應(yīng)用于人類醫(yī)藥和農(nóng)藥中。白僵菌素所具有的解熱、降膽固醇、抗驚厥和祛痰等作用，使其在臨床上用于治療流行性腮腺炎和上呼吸道感染等病毒性疾??；作為農(nóng)藥，其還可用于農(nóng)業(yè)或林業(yè)防治多種害蟲，如防治松毛蟲等。另外，白僵菌素還可作為先導(dǎo)化合物發(fā)現(xiàn)更多的殺蟲劑和藥物。因此，白僵菌素眾多的藥理活性和廣闊的應(yīng)用領(lǐng)域?qū)槠浼捌溲苌飵?lái)良好的市場(chǎng)前景。

生產(chǎn)方法

(a) 制備鐮刀菌LF061種子液

按以下比例制備種子培養(yǎng)基為： Yeast Extract 2g，Peptone4g, 葡萄糖4g，加蒸餾水定容至200 ml；調(diào)節(jié)pH值到5.8，121 ℃滅菌20 min。

將鐮刀菌LF061接種于種子培養(yǎng)基，28℃、轉(zhuǎn)速120 rpm培養(yǎng)48 h獲得種子液。

（b）鐮刀菌LF061種子液經(jīng)發(fā)酵制備白僵菌素：

液體發(fā)酵培養(yǎng)基制備：葡萄糖5g，可溶性淀粉20g，工業(yè)蛋白胨30g，氯化鉀0.1g，磷酸二氫鉀3g，硝酸鈉1g，七水硫酸鎂0.5g，碳酸鈣1g，加水定容至1000 ml，pH值自然，121 ℃滅菌30 min；

將鐮刀菌LF061種子液以體積百分比15 %的接種量接種于液體發(fā)酵培養(yǎng)基，于搖瓶中發(fā)酵，發(fā)酵溫度30 ℃，轉(zhuǎn)速160rpm，發(fā)酵時(shí)間96h，取發(fā)酵液測(cè)得白僵菌素為376μg/mL。

(c) 將1L發(fā)酵液以3000rpm離心，上清棄去，獲得菌絲體約100 ml。