背景及概述[1]
連接酶是一種能催化兩個(gè)不同或相同分子的兩端相連接的酶,此反應(yīng)與ATP分解反應(yīng)相偶聯(lián)。對(duì)于DNA損傷切除修復(fù)最后一步有連接功能的是DNA連接酶。該酶特異地催化兩條DNA單鏈片段相聯(lián)結(jié),也就是將DNA聚合酶重新合成的DNA補(bǔ)片連接到切除了DNA損傷的缺口的兩端。DNA連接酶還在復(fù)制和重組等過程中出現(xiàn)斷裂時(shí)有連接作用。很可能該酶還能對(duì)誘變劑(化學(xué)斷裂劑和電離輻射)所產(chǎn)生的DNA鏈斷裂有直接的連接作用,只要斷端是5′-PO4和3′-OH,而且兩斷端相近又易拉攏。所以DNA連接酶有時(shí)能一步完成DNA鏈斷裂的修復(fù)。對(duì)于DNA雙鏈斷裂,則似乎不是由DNA連接酶直接修復(fù),而是先由RecA蛋白質(zhì)在DNA兩斷端之間形成細(xì)絲使兩端對(duì)準(zhǔn)。
在某種情況下,DNA斷裂需要先由外切核酸酶形成一個(gè)空源,再由DNA聚合酶合成補(bǔ)片,然后才連接。ssDNA/RNA環(huán)化連接酶為熱穩(wěn)定的DNA/RNA連接酶,不依賴于ATP,可催化單鏈DNA或單鏈RNA的環(huán)化,也可催化其分子間連接,但其對(duì)單鏈DNA的連接效率更高。環(huán)化反應(yīng)中,要求催化底物單鏈DNA/RNA具有5’-磷酸基團(tuán)和3’-OH基團(tuán)。對(duì)于大于15nt的單鏈底物,該酶都能高效的連接。該酶還可催化DNA或RNA分子與預(yù)腺苷化的DNA接頭之間的連接,另外,在ATP過量的情況下,該酶可使DNA/RNA分子腺苷化。-20℃可保存3年。
主要參考資料
[1] 衛(wèi)生學(xué)大辭典