三羥甲基氨基甲烷常簡(jiǎn)稱Tris,廣泛用于制備生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的緩沖液,如生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的TAE和TBE緩沖液(用于溶解核酸)都要用Tris。它有氨基,可與醛縮合反應(yīng)。
性質(zhì)
三羥甲基氨基甲烷是一種白色結(jié)晶體,熔點(diǎn):168-171℃,沸點(diǎn):219-220°C。其溶于水和甲醇、乙醇、乙酸等有機(jī)溶劑,微溶于乙酸乙酯、苯、不溶于乙醚。它對(duì)銅、鋁有腐蝕作用,有刺激性。
緩沖特性
弱堿,室溫(25℃)酸度系數(shù)8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液有效緩沖范圍在酸度值7.0到9.2之間;水溶液酸度值10.5左右,一般加入鹽酸調(diào)至所需pH值,即可獲得該pH值的緩沖液,但同時(shí)應(yīng)注意溫度會(huì)影響Tris的pKa。
制備
三羥甲基氨基甲烷可由兩步反應(yīng)生成:先由硝基甲烷生成三羥甲基硝基甲烷((HOCH2)3CNO2),再還原得到Tris。
用途
三羥甲基氨基甲烷不僅廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,還有許多重要用途:
用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng);
Tris緩沖液離子強(qiáng)度低,可用于形成線蟲(chóng)(C. elegans)核纖層蛋白(lamin)的中間纖維;
蛋白質(zhì)電泳緩沖液主要成分之一;
制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物;
用作滴定標(biāo)準(zhǔn)。
毒性
對(duì)于三羥甲基氨基甲烷的毒性,科學(xué)界進(jìn)行了大量的研究。這些研究結(jié)果表明,三羥甲基氨基甲烷的毒性相對(duì)較低,并且在正確的使用方法下,不會(huì)對(duì)人體和環(huán)境產(chǎn)生嚴(yán)重的影響。
從急性毒性角度來(lái)看,三羥甲基氨基甲烷的毒性較低。相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,三羥甲基氨基甲烷的大鼠口服的半數(shù)致死量(LD50)低于4460mg/kg時(shí),屬于低毒性物質(zhì)。此外,其皮膚吸收性差,不會(huì)經(jīng)皮膚吸收中毒,也不會(huì)引起人體皮膚過(guò)敏。