背景[1-3]
營養(yǎng)瓊脂是一種常用的微生物培養(yǎng)基，主要用于一般細菌的培養(yǎng)。其成分主要包括蛋白胨、牛肉膏、氯化鈉以及瓊脂。這些成分提供了細菌生長所需的營養(yǎng)物質。其中，蛋白胨和牛肉膏富含氮源、碳源以及多種維生素，是細菌生長的重要能量來源；氯化鈉則用于調節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓，使其接近細菌生長的自然環(huán)境；瓊脂則作為凝固劑，使培養(yǎng)基形成固體狀態(tài)，便于細菌在其表面生長并形成菌落。
營養(yǎng)瓊脂的制備過程相對簡單，主要是將各成分溶解于蒸餾水中，加熱溶解，然后校正pH值至適宜范圍，最后分裝、滅菌即可。根據使用目的的不同，瓊脂的用量也會有所調整。例如，用于菌落計數時，瓊脂量通常為1.5%；而用于制作平板或斜面時，瓊脂量則為2%。
此外，市場上也有現(xiàn)成的營養(yǎng)瓊脂藥品供應，這些產品已經調配好各成分的比例，并調整了pH值，用戶只需加水后即可直接制作培養(yǎng)基，無需自行配制。這為實驗室工作提供了極大的便利。
營養(yǎng)瓊脂
營養(yǎng)瓊脂在微生物學、食品科學、醫(yī)藥等領域具有廣泛的應用。例如，在食品工業(yè)中，營養(yǎng)瓊脂可用于檢測食品中的微生物污染情況；在醫(yī)藥領域，它可用于細菌的培養(yǎng)和鑒定，為疾病的診斷和治療提供依據。
雖然營養(yǎng)瓊脂為細菌的生長提供了良好的環(huán)境，但并非所有細菌都能在其上生長。因此，在選擇培養(yǎng)基時，應根據目標細菌的特性進行選擇。同時，制備和使用營養(yǎng)瓊脂時，也應注意遵守實驗室安全規(guī)范，避免交叉污染和其他安全問題。
應用[4-5]
營養(yǎng)瓊脂可以用于鐘山區(qū)雞沙門氏菌病病原分離及耐藥性研究
沙門氏菌病是一種人畜共患病,而且隨著抗菌藥物的濫用,沙門氏菌耐藥性越來越強,使得該病的防控變得越來越復雜?；诹P水市鐘山區(qū)雞沙門氏菌病比較常見,且防控困難的現(xiàn)實,本研究在對六盤水市鐘山區(qū)沙門氏菌病進行流行病學調查的基礎上,開展了沙門氏菌的分離鑒定、藥敏試驗、耐藥基因分析等研究。
1. 鐘山區(qū)雞沙門氏菌病流行病學調查及其病原菌分離與鑒定。本研究于2017年1月～2019年12月期間對兩種不同養(yǎng)殖方式的6個養(yǎng)雞場的雞群進行定期采樣(每兩個月采集一次血清樣本),通過平板凝集試驗檢測沙門氏菌特異性抗體;通過臨床癥狀觀察和系統(tǒng)的病理剖檢對發(fā)病雞進行初步診斷,然后采集病雞的肝臟、脾臟、心臟組織樣本進行沙門氏菌分離,分別使用普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯和麥康凱瓊脂固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng),觀察細菌生長狀態(tài);通過革蘭氏染色觀察細菌形態(tài);利用14種生化管對分離菌進行生化特性鑒定;對3株分離菌的16S r DNA基因進行PCR擴增、測序及遺傳進化分析。平板凝集試驗結果顯示,所調查的養(yǎng)雞場中沙門氏菌平均檢出率為22.3%,其中地面平養(yǎng)方式養(yǎng)雞場的平均檢出率為26.4%,籠養(yǎng)方式養(yǎng)雞場的平均檢出率為18.4%,可見地面平養(yǎng)雞群的沙門氏菌病相較籠養(yǎng)雞群更為嚴重。對發(fā)病雞的臨床診斷結果顯示,病雞精神萎頓,怕冷且不愿走動,羽毛松亂,翅下垂,腹瀉且糞便在泄殖腔周圍呈白色漿糊狀;剖檢可見其肝臟、脾臟等腫大充血,且脾臟表面有結節(jié),腹腔內存在腹水,腸道炎癥等,其癥狀和剖檢病變與雞沙門氏菌病相符。
分離培養(yǎng)結果顯示,分離菌在普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上的菌落為直徑2～4mm,白色半透明、濕潤光滑、圓形且邊緣整齊,在麥康凱培養(yǎng)基上的菌落為無色透明、圓形隆起,均與沙門氏菌的培養(yǎng)特性一致。革蘭氏染色結果顯示,分離菌為大小均勻、兩端鈍圓、無莢膜、無芽孢的紅色短桿菌,符合典型的沙門氏菌革蘭氏染色特征。
參考文獻
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