背景^[1-6]

ADME及藥代動(dòng)力學(xué)檢測(cè)服務(wù)是藥物“吸收（Absorption）、分布（Distribution）、代謝（Metabolism）和外排（Excretion）”的簡(jiǎn)稱，代表了藥物進(jìn)入機(jī)體后機(jī)體對(duì)藥物的處置過程。藥物的這四個(gè)屬性決定了一個(gè)藥物在體內(nèi)的濃度、組織分布和代謝途徑，對(duì)于預(yù)測(cè)藥物的生物利用度和生物活性（即一個(gè)藥物能否到達(dá)它的作用靶點(diǎn)并產(chǎn)生相應(yīng)的治療效果）具有非常重要的參考價(jià)值。

因此，了解化合物的ADME特性對(duì)于藥物研發(fā)過程有著極為重要的意義。藥物研發(fā)是一個(gè)高風(fēng)險(xiǎn)、高投入、但同時(shí)也是一個(gè)高回報(bào)的過程。在這一過程中越早對(duì)藥物ADME特性進(jìn)行評(píng)估和優(yōu)選，越能及時(shí)排除掉那些ADME特性不好化合物，大大減少后期不必要的投入和資源的浪費(fèi)。全面的ADME檢測(cè)服務(wù)，包括高通量ADME篩選、體外藥物代謝檢測(cè)、藥物滲透性和轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)等。

1.高通量ADME篩選

作為一個(gè)早期藥篩的強(qiáng)大工具，高通量技術(shù)已經(jīng)廣泛地運(yùn)用于先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化過程中，并使快速有效地篩選大批量化合物成為可能。我們的高通量ADME篩選服務(wù)可以針對(duì)客戶的具體要求進(jìn)行個(gè)性化調(diào)整，以滿足不同客戶的特殊服務(wù)需求。我們配備了先進(jìn)的儀器設(shè)備，能夠在一周的時(shí)間內(nèi)完成大約300個(gè)化合物的篩選。

ADME篩選過程主要包括以下步驟：

(1)待篩選藥物孔板點(diǎn)樣

(2)MS/MS方法優(yōu)化

(3)ADME檢測(cè)

(4)LC-MS/MS原始數(shù)據(jù)收集和處理

2.藥代動(dòng)力學(xué)檢測(cè)

藥代動(dòng)力學(xué)是藥物穿過生物膜的能力是影響藥物穿過消化道黏膜被吸收入血并通過血液進(jìn)入各個(gè)組織器官的一個(gè)重要因素。藥物滲透性差會(huì)導(dǎo)致藥物的不良吸收或者影響其在體內(nèi)的分布。藥物的穿膜能力主要受被動(dòng)擴(kuò)散和主動(dòng)運(yùn)輸兩個(gè)方面的影響。包括：Caco-2滲透轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)（單向或雙向），MDCK/MDR1-MDCK滲透性實(shí)驗(yàn)人造膜通透性實(shí)驗(yàn)（PAMPA），轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)（P-gp，BCRP，BSEP，OAT1，OAT3，OATP1B1，OATP1B3，OCT1，OCT2。

藥物的安全性和有效性是藥物研發(fā)過程中最為重要的兩個(gè)方面，而這兩者在很大程度上都會(huì)受到藥物代謝途徑和藥物之間相互作用的影響。由于藥物進(jìn)入機(jī)體后通常會(huì)被代謝為一個(gè)或者多個(gè)活性增強(qiáng)或者減弱的代謝產(chǎn)物，因此藥物的代謝速率、代謝產(chǎn)物的生物活性及清除過程都會(huì)直接影響到藥物以活性形式在機(jī)體內(nèi)的存留時(shí)間，進(jìn)而影響到血藥濃度并可能引起毒性反應(yīng)。

此外藥物與藥物代謝酶之間的相互作用也會(huì)影響到其它藥物的代謝速率和在機(jī)體內(nèi)的存留時(shí)間。因此，了解藥物的代謝途徑對(duì)于更好地預(yù)測(cè)藥物毒性或副作用以及藥物之間相互作用有非常重要的意義，同時(shí)這些信息也可以為給藥方案的制定（包括合并用藥）提供一定的指導(dǎo)。

應(yīng)用^[7][8]

ADME及藥代動(dòng)力學(xué)檢測(cè)服務(wù)可用于藥物的綜合性評(píng)價(jià)：

在抗腫瘤化合物F18的肝微粒體體外代謝和大鼠體內(nèi)代謝研究中細(xì)胞色素P450(Cytochrome P450,CYP450)是參與代謝外源性和內(nèi)源性物質(zhì)最重要的酶系,在新藥開發(fā)早期階段,通過體外方法研究主要CYP酶介導(dǎo)的代謝特性,并通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證,已經(jīng)成為發(fā)現(xiàn)和篩選有效、安全的新化合物實(shí)體的必備環(huán)節(jié)。利用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)鑒定新化合物實(shí)體在機(jī)體內(nèi)的代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu),明確其在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化和排泄途徑,為藥物的安全性、有效性提供依據(jù)。

F18是由本課題組合成的一種含喹唑啉的異羥肟酸類化合物,前期研究表明其對(duì)組蛋白去乙?；?Histone deacetylase,HDAC)中的HDAC6具有很好的選擇性抑制作用和抗腫瘤藥理活性。小分子抗腫瘤藥物進(jìn)行了體外和體內(nèi)代謝初步研究,主要包括F18的肝微粒體體外代謝研究、F18對(duì)大鼠體內(nèi)CYP3A1抑制作用研究以及F18在大鼠體內(nèi)代謝產(chǎn)物研究三部分。

1.F18的肝微粒體體外代謝研究：(1)肝微粒體中F18測(cè)定方法的建立與驗(yàn)證采用超高效液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)建立肝微粒體孵育體系中F18的檢測(cè)方法,并對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)的方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果顯示所建立的分析方法專屬性強(qiáng),線性關(guān)系良好,靈敏度、準(zhǔn)確度高,穩(wěn)定性好,滿足生物樣品分析方法的一般要求,可用于F18在肝微粒體中的定量分析。(2)F18在肝微粒體中代謝穩(wěn)定性研究采用人、大鼠、犬和猴的肝微粒體酶,考察F18在不同種屬肝微粒體中的代謝穩(wěn)定性和代謝產(chǎn)物,比較代謝的種屬差異。

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